小鼠CD8 T细胞分离试剂盒

一、产品简介

小鼠CD8 T细胞分离试剂盒，本试剂盒采用阴选的方式，通过无柱磁极分离小鼠脾脏中的CD8 T细胞。分离过程中抗体和磁珠不会接触CD8 T细胞，能够最大限度保持T细胞最原始的状态。
• 操作简便
• 无需裂红
• 纯度最高可达99%
• 18-20分钟完成分离
试剂盒通过生物素偶联的抗体标记非CD8 T细胞，再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联，然后通过磁极进行无柱分离。目标细胞只需倒入一个新的管中即可完成分离，分离后的细胞可立即用于后续应用，如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。

二、产品目录表

EasylsoTM mouse CD8 T cell isolation kits（阴选，大包装）	SN4103L	up to 1X10^9细胞
EasylsoTM mouse CD8 T cell isolation kits（阴选，中包装）	SN4103M	up to 5X10^8细胞
EasylsoTM mouse CD8 T cell isolation kits（阴选，小包装）	SN4103S	up to 1X10^8细胞

三、试剂盒组分

产品名称	存储条件	缓冲液成分	功能
EasyIso™ Mouse CD8 T Cell Isolation Cocktail	4°C保存，避免冷冻	PBS, 0.1% BSA	识别非CD8 T细胞抗体混合液，标记非目的细胞
EasyIso ™ Streptavidin Nanobeads	4°C保存，避免冷冻	PBS, 0.1% BSA	磁珠结合非CD8 T细胞，通过磁极去除

 

BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline

运输条件： 4°C运输

设备和试剂要求

· 缓冲液：FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)

· 耗材：70 μm无菌尼龙滤网；无菌离心管

· 仪器：离心机，磁力架

温馨提示

· 脾脏样本无需裂红处理

· 采用FACS Buffer而不是PBS进行操作，能够提高细胞得率

· 确保FACS Buffer渗透压稳定，免疫细胞较为敏感

· 确保每一步无菌操作，谨防污染

 

四、操作步骤

步骤	说明	剂量和时间
1	准备脾脏单细胞悬液至指定浓度	1 x 10^8 cells/mL
2	加入EasyIso™ Mouse CD8 T Cell Isolation Cocktail至样品中	100 μL/mL
3	抗体和细胞孵育	常温孵育10 min
4	震荡混匀 Streptavidin Nanobeads	混匀30 s
5	加Streptavidin Nanobeads至样品中	100 μL/mL
6	轻柔混匀磁珠和细胞，孵育	常温孵育5 min
7	加入FACS Buffer到样品中，轻轻混匀	总体积加入至2.5 mL （5 mL流式管） 总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管)
8	样品置于磁力架上，使磁珠吸附	单孔磁力架吸附（3 min） 联排磁力架吸附（5 min）
9	倾斜磁力架，将样品倒入新的收集管中，收集样品	细胞分离成功

 

五、数据展示

 

 

 

如图：小鼠脾脏CD3 T 细胞的分离。（A）分离C57BL/6背景小鼠的脾脏，磨碎后采用70 μm无菌尼龙滤网过滤后，进行CD8和CD3染色，CD3+CD8+比例约11.1%。（B）采用（#SN4103）分离CD8 T细胞，分选后的CD3+CD8+细胞纯度高达94%。

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