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6个月
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深圳顺辰生物科技有限公司
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常温
白蛋白检测试剂盒(溴jia酚绿法)
产品描述:
白蛋白检测试剂盒(Albumin Assay Kit)是一种特异灵敏的检测白蛋白(Albumin)浓度的试剂盒。白蛋白是最主要的血浆蛋白,占血浆总蛋白的60%左右。白蛋白在维持胶体渗透压和结合长链脂肪酸、胆汁酸、胆红素、钙和镁等物质方面发挥重要作用,同时还具有抗氧化和抗凝功能。白蛋白由肝脏细胞合成,检测白蛋白浓度对于评价肝功能、肾功能、肠道功能、营养不良具有重要意义。
本试剂盒利用溴jia酚绿(Bromocresol Green, BCG)与白蛋白特异结合形成的产物能够特异吸收620nm波长可见光,从而通过测定620nm吸光度定量检测白蛋白浓度。
产品应用:
本试剂盒在白蛋白浓度处于5-50mg/ml之间时,利用拟合二项式标曲分析白蛋白浓度;在白蛋白浓度处于1-10mg/ml时,利用直线标曲分析白蛋白浓度。本试剂盒能够检测血浆和血清样品中的白蛋白。
需要而未提供的试剂及器材:
1. 超纯水
2. 系列可调节量程移液器及吸头
3. 离心管及96孔板
4. 酶标仪
储存条件:
干冰运输,收到试剂盒后置于-20℃储存,有效期12个月。
注意事项:
1. 每次测定时利用标准品制作标准曲线;
2. 实验过程中,除检测缓冲液外,其它试剂请置于冰上;
3. 本产品仅限专业人员用于科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
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文献和实验%磷酸50mL 及浓盐酸100mL,充分混和后,接上回流冷凝管,以小火回流10h(烧瓶内加小玻璃珠数颗,以防止溶液沸溢)。回流结束后再加入150g 硫酸锂(Li2SO4),50mL 蒸馏水及液溴数滴,然后开口继续沸腾15min,以驱除过量的溴,冷却后溶液呈鲜黄色(如仍呈绿色,须再重复滴加溴水的步骤),冷却后加蒸馏水定容至1000mL,过滤,即成Folin—酚乙试剂,滤掖置于棕色试剂瓶中,可在冰箱内长期保存。若此储存液使用过久,颜色由黄变绿,可加几滴液溴,煮沸数分钟,恢复原色仍能继续使用。
一、原理LoWry法是双缩脲法(Biuret)和福林酚法(Folin-酚)的结合与发展。其原理是蛋白质溶液用碱性铜溶液处理后,碱性铜试剂与蛋白质中的肽键作用产生双缩脲反应,形成铜—蛋白质的络合盐。再加入酚试剂后,在碱性条件下,这种被作用的蛋白质上的酚类基团极不稳定,很容易还原酚试剂中的磷钨酸和磷钼酸,使之生成磷钨蓝和磷钼蓝的混合物。这种溶液蓝色的深浅与蛋白的含量成正相关,所以可以用于蛋白质含量的测定。LoWry法除使肽链中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等显色外,还使双缩脲法中肽键的显色效果更强烈
,以便驱除过量的溴,冷却后定容到1000ml。过滤,如显绿色,可加溴水数滴使氧化至溶液呈淡黄色。置于棕色瓶中暗处保存。使用前用标准氢氧化钠溶液滴定,酚酞为指示剂,以标定该试剂的酸度,一般为2mol/L左右(由于滤液为浅黄色,滴定时滤液需稀释100倍,以免影响滴定终点的观察)。使用时适当稀释(约1倍),使最后浓度为lmol/L酸。 (3)标准蛋白质溶液:用分析天平精密称取牛(或人)血清白蛋白100毫克,用少量蒸馏水完全溶解后,转移至100毫升容量瓶中,准确稀释至刻度,使蛋白质浓度1mg/ml。
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