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用于免疫沉淀的 Dynabeads™ 蛋白 A

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  • Invitrogen™
  • 10001D
  • 2025年07月11日
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      用于免疫沉淀的 Dynabeads™ 蛋白 A

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    • 供应商

      嵘崴达

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    • 规格

      1 mL

    用于免疫沉淀的 Dynabeads™ 蛋白 A

    货号 10001D
     
    Dynabeads 蛋白 A 为表面共价偶联有重组蛋白 A (∼45 kDa)的 2.8 µm 均匀超顺磁性微珠。Dynabeads 蛋白 A 为免疫沉淀(IP)提供了可替代 Sepharose 树脂或琼脂糖树脂的出色替代产品,手动和自动方案均可用。

    •在不到40分钟内完成 IP
    • 高靶蛋白得率和低抗体消耗
    • 极低非特异性结合及高信噪比
    • 无需色谱柱、离心步骤或耗时的预清洗步骤
    •高重现性和高通量与 KingFisher 仪器兼容

    可快速且简便的进行手动 Dynabeads 分离
    手动方案简单且可在40分钟内完成。首先,将靶蛋白的抗体与 Dynabeads 蛋白 A 在试管中孵育 10 分钟。通过将试管置于 DynaMag 磁力架中并去除上清液,洗去过量抗体。然后,抗体包被磁珠可用于多种下游应用,包括 IP、Co-IP、染色质 IP (ChIP)、RNA IP (RIP)、小规模 IgG 纯化和蛋白纯化。由于 Dynabeads 的独特磁性,使用 DynaMag 磁力架可轻松收集结合材料。微珠上的重组蛋白 A 不含白蛋白结合位点,因此在程序中不会共纯化白蛋白。IP 速度快,并且具有高得率、高重现性且非特异性结合极少,因此无需预清洗步骤。
     
     
    上海嵘崴达实业有限公司,专业经营生命科学领域的科研试剂、仪器和实验室消耗品,
    致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
    主要经营的试剂品牌:
    Roche试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
    GE试剂,耗材,部分常用现货,周二,周五定货,3周左右。
    SIGMA试剂,周一,五定货,3周左右到货。

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    THERMO试剂,部分现货,周三定货,2-3周到货。
    ABCAM试剂,国内现货三天左右,期货四周左右。
    Peprotech试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。

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    • 免疫沉淀原理

      这个区域的蛋白质相互作用。因此裂解液配方最佳的NaCl浓度要视所分析的蛋白的亚细胞定位而定。 3. 甘油由于其粘性,可以对蛋白质之间的相互作用起到一个很好的保护作用。一般添加10%的甘油有助于稳定蛋白质之间的相互作用。 4. 裂解液中的去垢剂可以裂解细胞质膜,也同时破坏了许多细胞器的膜,从而释放了其中储存的许多蛋白酶。而由于用于免疫沉淀实验的去垢剂作用比较温和,因此蛋白酶的活性大部分得以保存。还有一部分蛋白酶来自胞质中,主要由于其抑制蛋白或者其活性抑制环境受到改变后从而恢复了蛋白

    • 用于蛋白质表达和纯化的pET-32α(+)载体的构建

      ,或者可以表达以产生重组蛋白。pET-32α(+)载体系列用于表达与109 aa Trx•Tag硫氧还蛋白融合的肽序列。它属于一种表达系统,可在其激活后产生所需的蛋白质。插入原核宿主细胞。原核细胞如大肠杆菌因为它们廉价,快速的生物量积累和简单的工艺规模扩大,因此是外源蛋白表达的首选宿主。在本文中,我们将重点总结这种在我们的实验室中使用的有用技术。表达后pET-32α(+)载体的构建,蛋白质表达和蛋白质纯化将在本文中详细描述。获得用于构建载体的外源DNA片段插入载体的DNA通常可以使用聚合酶链式反应(PCR

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