蔗糖溶液(20%)水溶 无菌

无菌动物技术

网络     四、无菌动物技术 无菌动物在自然界并不存，必须用人为的方法养育而成。一般将临产前的健康动物用麻醉药品或拉断颈椎处死后，立即浸泡在37℃灭菌液中，送进无菌室（或无菌隔离器），按无菌手术进行剖腹，切除带胎子宫（子宫内首先应无菌），将其浸入消毒液里并立即输送到另一只隔离器中，切开子宫取胎，经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐（电刀切断）后，放入隔离器内人工喂乳

无菌感染期线虫RNA的提取

   19) 小心弃上清，微离，吸去剩余乙醇，室温干躁10 min；    20) 各管用50 μL DEPC处理过的双蒸去离子水溶解，分装，-80℃贮存（可贮存5周）；    21) 以紫外分光光度法和1％琼脂糖凝胶电泳检测RNA浓度和质量。 3. 总RNA 浓度的测定（紫外分光光度计法） 取待测RNA样品10 µL至一洁净离心管中，加蒸馏水稀释到2 mL，转入到DEPC处理过的石英比色杯中，小心排掉气泡，以等体积蒸馏水进行

无菌感染期线虫的诱导培养

参照Han et al. （1990）[1] 和韩日畴（1995）[2] 建立的方法，将无菌S. carpocapsae 的A24品系与X. poinarii 的RS92 共生细菌菌株建立单菌组合（RS A）并用人工培养基进行体外培养[3,4] 。人工培养基成分为1％蛋白胨，1％牛肉浸膏，20%鸡蛋，15％豆粉，5%猪油，8%聚乙醚氨基甲酸酯海绵和50%无离子水[93] 。培养温度25℃。 2. 无菌感染期线虫S. carpocapsae A24的获得 上述线虫培养30天后