考马斯亮蓝标准染色液套装(染色液+脱色液) G-250

考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量定

试剂 考马斯亮蓝G-250 的配制：称取100mg 考马斯亮蓝G-250，溶于50mL90％乙醇中，加入85％（W／V）的磷酸100mL，最后用蒸馏水定容到1 000mL。此溶液在常温下可放置一个月。 （3）乙醇 （4）磷酸（85％）四、操作步骤 1．标准曲线制作 （1）0~100μg／mL 标准曲线的制作：取6 支10mL 干净的具塞试管，按表1 取样。盖塞后，将各试管中溶液纵向倒转混合，放置2min 后用1cm

考马斯亮蓝G—250染色方法

一、原理：考马斯亮蓝G—250法于1976年由Bradform建立。考马斯亮蓝G—250具有红色和蓝色两种色调，在酸性溶液中，其以游离态存在呈棕红色，当它与蛋白质通过疏水作用结合后，变为蓝色。色素对可见光谱的最大吸收值从465nm转移到595nm处。蛋白质和色素的结合反应很快速，约在2分钟左右的时间内达到平衡，在室温1小时之内是稳定的。在0．01一1.0mg蛋白质／m1范围内，蛋白质含量与A 595值呈正比。二、染液配制： 100mg的考马斯克蓝G—250溶解于50m1 95％的乙醇中，加入

用考马斯亮蓝R－250染色

  用考马斯亮蓝 R － 250 染色   1． 凝胶的固定液中轻微摇荡至少 1 小时。 2． 凝胶在染色液中摇荡过夜或至少 1 小时。 3． 胶在脱色液中摇荡过夜或至少 1 小时以消除背景。 4． 凝胶放于保存液中至少 4 小时以进一步脱色。在最初的 1 小时内换两次溶液