考马斯亮蓝快速染色液（G-250）

考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量定

水研磨成匀浆，转移到 离心管 中，再用6mL 蒸馏水分次洗涤研钵，洗涤液收集于同一 离心管 中，放置0.5~1h 以充分提取，然后在4 000r/min 离心20min，弃去沉淀，上清液转入10mL 容量瓶，并以蒸馏水定容至刻度，即得待测样品提取液。 （2）测定：另取2 支10mL 具塞 试管 ，按下表取样。吸取提取液0.1mL（做一重复），放入具塞刻度 试管 中，加入5mL 考马斯亮蓝G-250 蛋白

考马斯亮蓝R-250 G-250的区别在哪？

一般R250 染蛋白，G250 一般测蛋白浓度，也可染胶，敏感性更高但较慢脱色较难。 G250常用的蛋白染料，作定性试验用,染色后为蓝绿色;R250较敏感,，做定量实验用,染胶效果较好.染色后为红蓝色 考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）。C45H44O7H3S2Na，MW=824，λmax

考马斯亮蓝G—250染色方法

一、原理：考马斯亮蓝G—250法于1976年由Bradform建立。考马斯亮蓝G—250具有红色和蓝色两种色调，在酸性溶液中，其以游离态存在呈棕红色，当它与蛋白质通过疏水作用结合后，变为蓝色。色素对可见光谱的最大吸收值从465nm转移到595nm处。蛋白质和色素的结合反应很快速，约在2分钟左右的时间内达到平衡，在室温1小时之内是稳定的。在0．01一1.0mg蛋白质／m1范围内，蛋白质含量与A 595值呈正比。二、染液配制： 100mg的考马斯克蓝G—250溶解于50m1 95％的乙醇中，加入