Ficoll Plus 1.090

Ficoll密度梯度离心法

　　测定细胞免疫功能首先要从人或动物外周血或组织中获取有活性的细胞，如淋巴细胞、巨噬细胞、粒细胞等。取得有活性的细胞应根据不同目的，采用不同方法，考虑：(1)细胞纯度；(2)细胞获得量；(3)细胞活力；(4)使用方法的简易程度和本室条件等。目前常用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化外周血单个核细胞。 　　(一)　原理: 　　常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层

外周血单个核细胞的分离:Ficoll分层液法和Percoll分层液法

　　外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞密度较大，为1.090左右，而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075～1.090，血小板为1.030～1.035。为此利用一种密度介于1.075～1.092之间而近于等渗的溶液（分层液）做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。常用的分层液有Ficoll和Percoll两种。 　　（一）Ficoll分层液法

组织解离的常见问题及答案

性选择不同强度的解离方式。 （1）根据肿瘤组织的坚硬度和目的细胞不同，可以选择合适的解离方案。 （2）剔除坏死/出血区域（剪刀精细修剪），保留活性肿瘤组织。 （3）由于肿瘤组织比较坚硬，会产生较多碎片和死细胞，影响下游实验可以通过Ficoll或者去死或碎片去除试剂盒（Debris Removal Solution，130-109-398）优化肿瘤样本。   6. 如何得到肝实质细胞？ 小鼠和大鼠的肝脏组织包含实质细胞和非实质细胞（Kupffer细胞、肝星状细胞、肝窦内皮细胞、胆管上皮细胞、免疫