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文献和实验Nature 子刊:高彩霞团队开发可预测的精细下调目标基因蛋白表达的新方法
降。OsDLT 基因编码 GRAS 蛋白家族成员,参与了水稻油菜素内酯信号转导途径,调控水稻株高、分蘖数、种子大小等多个重要农艺性状。该研究中以 OsDLT 基因为靶标,通过编辑 OsDLT 基因的 5'UTR,获得了一组具有不同叶夹角、株高和分蘖数的突变体,且突变体的表型变化趋势与瞬时系统预测结果一致。 通过编辑 uORF 培育具有目标性状的水稻植株。(a, b) 从头创制新的 uORFs (a) 或延伸内源 uORFs (b) 抑制目标基因的蛋白表达。(c) 通过产生一系列具有不同抑制
1μg生长素;1kg向日葵鲜叶中的玉米素(一种细胞分裂素)约为5~9μg。? 由于植物体内植物激素含量很少,难以提取,无法大规模在农业生产上应用。随着研究的深入,人们合成(或从微生物中提取)了多种与植物激素有相似生理作用的物质,称为植物生长调节剂(plant growth regulators)。? 除了五大类植物激素外,人们在植物体内还陆续发现了其它一些对生长发育有调节作用的物质。如油菜花粉中的油菜素内酯,苜蓿中的三十烷醇,菊芋叶中的菊芋素(heliangint),半支莲叶中的半支
型的蛋白,或进行高解析度的结构分析,愈来愈多的实验组选择哺乳类表达系统来生产融合蛋白。其原因为哺乳动物细胞生产出的重组蛋白与人类蛋白十分相似,有较完整的蛋白折叠、组合及翻译后修饰[3]。因此,愈来愈多科学家们更加关注于—如何从哺乳类细胞中高效的纯化目标蛋白。1 亲和标签的选择首先,需考虑选择合适的亲和标签。常用于哺乳动物表达系统的亲和标签有 His-tag、FLAG-tag、GST-tag及 Strep-tag® 等[4-12],整理于下表:(点击放大查看)这些亲和标签在使用上各有千秋。使用
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