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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8°C储存;避光
- 英文名:
SDS-PAGE Stacking Gel Master Mix
- 库存:
询盘
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
S743297-500ml/S743297-250ml
| 规格: | S743297-500ml | 产品价格: | ¥357.9 |
|---|---|---|---|
| 规格: | S743297-250ml | 产品价格: | ¥200.9 |
英文名:SDS-PAGE Stacking Gel Master Mix
纯度或规格:0
SPU:S743297
CAS:-
存储温度:2-8°C储存;避光
运输条件:低温运输
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文献和实验10孔梳子插入玻璃板之间。确保无气泡产生(图 7)。让浓缩胶聚合60分钟。 •在900 ml蒸馏水中稀释100 ml 10 X缓冲液,并添加SDS, 制成最后浓度为3.5mM的 SDS-PAGE电泳缓冲液。 •将两个翼型扳手均匀施力掰开,从灌胶模具中取出凝胶三明治夹。通过灌胶模具背后留的两个大孔,轻轻向上将三明治夹推出(图 8)。 •将电极放入垂直电泳槽内。贴着电极壁,将凝胶三明治夹垂直方向插入电极中(图 9)。 •把凝胶三明治夹置于合适的位置后,关闭电极门(图10)。
在其中插入一块干净的梳子,注意不要混入气泡,然后在家一些积层胶溶液彻底填满梳子之间的空隙,将胶垂直放置等待胶凝固。☞ 配方如下下层胶(via《分子克隆实验指南 第三版》)上层胶(via《分子克隆实验指南 第三版》)每块胶需配 1 ml,同样注意最后加入 TEM,最后将液用枪均匀打入即可,待干了后即使用。☞ 样品处理e.g. 6XSDS-PAGE 上样缓冲 4 ul + 蛋白液 20 ul 与小 EP 管中,将其放入沸水中 5 mln,再 8 000 r 离心 5 min。若有多余的孔道可以用上
。也可以用考马斯亮蓝快速染色液对完成转膜的SDS-PAGE胶进行染色,以观察蛋白的残留情况。 4. 封闭(Blocking): 转膜完毕后,立即把蛋白膜放置到预先准备好的Western洗涤液中,漂洗1-2分钟,以洗去膜上的转膜液。吸尽洗涤液,加入Western封闭液,在摇床上缓慢摇动,室温封闭60分钟。 从转膜完毕后所有的步骤,一定要注意膜的保湿,避免膜的干燥,否则极易产生较高的背景。 对于一些背景较高的抗体,可以4℃封闭过夜。 5. 一抗
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