CMT93-NLUC-bsd小鼠结肠癌细胞(NLUC标记)

CMT93-Nluc-bsd小鼠结肠癌细胞产品基本信息

细胞名称： CMT93-Nluc-bsd ，小鼠结肠癌细胞+nanoluc

种属来源：小鼠

组织来源：直肠

细胞形态：上皮细胞样

生长特性：贴壁生长

培养基:：90%DMEM+10% FBS+PS

生长条件：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃

传代方法：1:2 至 1:3 ，每周 2-3 次

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

支原体检测：无

注：该细胞 bsd 药筛浓度为 8.0 ug/ml ，培养过程中建议使用 2.0 ug/ml bsd 维持。

CMT93-Nluc-bsd小鼠结肠癌细胞培养操作

CMT93-Nluc-bsd小鼠结肠癌细胞复苏步骤

将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 4 mL 培养基混合均匀。在 1000 rpm 条件下离心 3 min，弃去上清液，加 1-2 mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或 将细胞悬液加入 6 cm 皿中，加入约 4mL 培养基，培养过夜)。第二天换液并检 查细胞密度。

CMT93-Nluc-bsd小鼠结肠癌细胞传代步骤

如果细胞密度达 80%-90% ，即可进行传代培养。

a 、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

b 、加 1 mL 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，使消化液浸润 所有细胞，将培养瓶置于 37℃培养箱中消化 1-3 min(视细胞情况而定)，然后 在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻 敲几下培养瓶后加 2-3ml 完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中， 1000 rpm 离心 5 min，弃去上清液，补加 1-2 mL 培养液后吹匀。

c 、将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8mL 培养基的新皿中或者瓶中，置于培养 箱中培养。

CMT93-Nluc-bsd小鼠结肠癌细胞冻存步骤

待CMT93-Nluc-bsd细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃 去上清液，用 PBS 清洗一遍，弃尽 PBS ，进行细胞计数。

b 、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度 5×106~ 1×107/mL ，轻轻混 匀，每支冻存管冻存 1mL 细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c 、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h 后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次 拿取。

培养注意事项

1. 收到CMT93-Nluc-bsd细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象， 若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血 清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而 导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分 细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。.观察好细胞 状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

5. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我 司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请 及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问 题解决。

6.该CMT93-Nluc-bsd细胞仅供科研使用。

7. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照 说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传 代建议 1 ：2 传代 。

8. 注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个 10cm 皿。