- ￥3000
- 逸漠/IMMOCELL
- IML-174
- 厦门
- 2026年03月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详询
- 细胞类型：
详询
- 肿瘤类型：
详询
- 供应商：
厦门逸漠生物科技有限公司
- 库存：
999
- 英文名：
K7M2wt-FLUC-puro
- 生长状态：
贴壁生长
- 年限：
长期
- 运输方式：
干冰运输
- 器官来源：
鼠源
- 是否是肿瘤细胞：
详询
- 细胞形态：
成骨细胞
- 免疫类型：
详询
- 物种来源：
鼠源
- 相关疾病：
详询
- 组织来源：
骨
- 规格：
1×106cells/T25或1mL冻存管
K7M2-WT-FLUC-puro小鼠骨肉瘤成骨细胞产品基本信息
Cat NO: IML-174
细胞名称：K7M2-WT-FLUC-puro，小鼠骨肉瘤成骨细胞+FLUC
种属来源：小鼠
组织来源：骨，来源肺转移灶
细胞形态：成骨细胞
生长特性：贴壁生长
培养基:：DMEM 培养基;优质胎牛血清，10%;双抗，1%
生长条件：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃
传代方法：1:2 至 1:3 ，每周 3 次
冻存条件： 90%血清，10%DMSO ，现用现配。
支原体检测：无
注：该细胞为稳定转染 Luc 的细胞，随细胞传代次数的增加，其 Luc 荧光强度会逐渐减弱。若实 验要求需要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。建议收到细胞后至少传 3 代，冻存留种 后再进行筛选。
初次进行细胞筛选时，建议加入终浓度为 1ug/ml 嘌呤霉素的完全培养基维持培养，若无细胞漂浮 或者漂浮较少，即可更换为含 2ug/ml 嘌呤霉素的完全培养基继续筛选，以此类推，至最高药物浓度为 5ug/ml。若筛选过程中，漂浮细胞大于 60%，则停止筛选，换成正常培养基培养，至细胞密度约 80%， 可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入 5ug/ml 嘌呤霉素时细胞正常增殖，可停止筛选，用不含 药完全培养基正常培养。
K7M2-WT-FLUC-puro小鼠骨肉瘤成骨细胞培养操作
K7M2-WT-FLUC-puro小鼠骨肉瘤成骨细胞复苏步骤
将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 4mL 培养基混合 均匀。在 1000 rpm条件下离心3 min ，弃去上清液，加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加 入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入 6 cm 皿中，加入约 4mL 培养基，培养过夜)。 第二天换液并检查细胞密度。
K7M2-WT-FLUC-puro小鼠骨肉瘤成骨细胞传代步骤
如果细胞密度达 80%-90% ，即可进行传代培养。
a 、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
b 、加 1 mL 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养 瓶置于 37℃培养箱中消化 1-3 min(视细胞情况而定)，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大 部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加 2-3ml 完全培养基终止消化。轻轻打匀后装 入无菌离心管中，1000 rpm 离心 5 min，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
c 、将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8mL 培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
K7M2-WT-FLUC-puro小鼠骨肉瘤成骨细胞冻存步骤
待K7M2-WT-FLUC-puro细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用 PBS 清洗一遍，弃尽 PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~ 1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻 存 1mL 细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c 、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h 后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养注意事项
1. 收到K7M2-WT-FLUC-puro细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请 及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因 子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及 剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于37℃ 培养箱放置 2-4h。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
5. 建议客户收到细胞后前3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。 由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以 便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
6.该K7M2-WT-FLUC-puro细胞仅供科研使用。
7.说备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照明书细胞培养条件 新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1 ：2 传代 。
8.注意： 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个 10cm 皿。
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