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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
XYbiotech
- 服务名称:
定量甲基化特异性PCR (qMSP) 检测服务
- 规格:
/位点/样本
一、服务简介
qMSP(Quantitative Methylation-Specific PCR)是在传统MSP基础上发展而来的荧光定量检测技术,具有高灵敏度、定量分析能力强等优势。通过实时PCR结合SYBR Green或TaqMan探针,实现对目标基因甲基化程度的精确检测。
本实验室采用国际标准化qMSP流程,适配多种样本类型,为肿瘤表观遗传标志物、早期诊断、预后评估等研究提供高质量数据支持。
二、技术优势
✅ 定量输出:可计算相对或绝对甲基化水平
✅ 高灵敏度:可检测低至1%甲基化比例
✅ 高通量:适配96孔/384孔平台,适合大批量检测
✅ 特异性强:采用特异性引物+荧光探针,避免非特异扩增
✅ 可标准化:适合临床研究与药物开发
三、适用研究方向
肿瘤甲基化生物标志物研究
癌前病变筛查与早期检测
表观遗传调控机制分析
药物敏感性及耐药性研究
干细胞与重编程机制探索
环境因素与DNA甲基化关联研究
四、实验流程概览
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样本DNA提取(组织、血液、cfDNA、FFPE等)
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亚硫酸氢盐处理(转化未甲基化C为U)
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特异性引物设计(M/U)
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荧光定量PCR检测(SYBR/TaqMan)
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Ct值分析与ΔCt/标准曲线处理
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生成甲基化水平报告
可提供参考基因(如ACTB、COL2A1)归一化分析
五、报告内容
标准报告包含:
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样本信息与处理记录
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实验方法与试剂信息
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Ct值表格与扩增曲线图
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相对甲基化百分比或ΔCt分析
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阳性/阴性/空白对照结果
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专业技术解读(可选)
可根据客户需求提供Excel原始数据、分析图表、个性化报告封面。
六、适用样本类型
| 样本类型 | 说明 |
|---|---|
| 新鲜组织/冷冻组织 | 高质量DNA,适合研究类检测 |
| 石蜡组织(FFPE) | 适合临床样本研究,推荐切片数≥4张(10μm) |
| 外周血cfDNA | 无创肿瘤筛查/液体活检常用样本 |
| 尿液/痰液/唾液 | 非侵入性样本,适合筛查研究 |
| 培养细胞/细胞系 | 适用于机制验证、靶点研究等 |
七、实验案例简述
✅ 案例一:MGMT甲基化与化疗反应性分析
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样本:胶质瘤FFPE样本
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方法:TaqMan qMSP检测MGMT启动子区甲基化
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结果:甲基化阳性样本对替莫唑胺反应更好,具有良好预后价值
✅ 案例二:RASSF1A甲基化在乳腺癌中的表达特征分析
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样本:乳腺癌患者血浆cfDNA
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方法:SYBR Green qMSP
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结果:乳腺癌组显著高甲基化水平(p<0.01),有望作为早筛标志物
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文献和实验Kahn SL, Ronnett BM, Gravitt PE, Gustafson KS. Quantitative methylation-specific PCR for the detection of aberrant DNA methylation in liquid-based Pap tests. Cancer. 2008 Feb 25;114(1):57-64. doi: 10.1002/cncr.23258. PMID: 18181097; PMCID: PMC2648805.
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