定量甲基化特异性PCR (qMSP) 检测服务
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  • qMSP (quantitative Methylation Specific PCR) 是一种基于亚硫酸氢盐转化和实时荧光PCR技术的定量检测DNA甲基化状态的方法。
  • 上海
  • 2025年11月25日
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      XYbiotech

    • 服务名称

      定量甲基化特异性PCR (qMSP) 检测服务

    • 规格

      /位点/样本

    一、服务简介

    qMSP(Quantitative Methylation-Specific PCR)是在传统MSP基础上发展而来的荧光定量检测技术,具有高灵敏度、定量分析能力强等优势。通过实时PCR结合SYBR Green或TaqMan探针,实现对目标基因甲基化程度的精确检测。

    本实验室采用国际标准化qMSP流程,适配多种样本类型,为肿瘤表观遗传标志物、早期诊断、预后评估等研究提供高质量数据支持。


    二、技术优势

    定量输出:可计算相对或绝对甲基化水平
    高灵敏度:可检测低至1%甲基化比例
    高通量:适配96孔/384孔平台,适合大批量检测
    特异性强:采用特异性引物+荧光探针,避免非特异扩增
    可标准化:适合临床研究与药物开发


    三、适用研究方向

     肿瘤甲基化生物标志物研究
     癌前病变筛查与早期检测
     表观遗传调控机制分析
     药物敏感性及耐药性研究
     干细胞与重编程机制探索
     环境因素与DNA甲基化关联研究


    四、实验流程概览

    1. 样本DNA提取(组织、血液、cfDNA、FFPE等)

    2. 亚硫酸氢盐处理(转化未甲基化C为U)

    3. 特异性引物设计(M/U)

    4. 荧光定量PCR检测(SYBR/TaqMan)

    5. Ct值分析与ΔCt/标准曲线处理

    6. 生成甲基化水平报告

     可提供参考基因(如ACTB、COL2A1)归一化分析


    五、报告内容

     标准报告包含:

    • 样本信息与处理记录

    • 实验方法与试剂信息

    • Ct值表格与扩增曲线图

    • 相对甲基化百分比或ΔCt分析

    • 阳性/阴性/空白对照结果

    • 专业技术解读(可选)

    可根据客户需求提供Excel原始数据、分析图表、个性化报告封面。


    六、适用样本类型

    样本类型 说明
    新鲜组织/冷冻组织 高质量DNA,适合研究类检测
    石蜡组织(FFPE) 适合临床样本研究,推荐切片数≥4张(10μm)
    外周血cfDNA 无创肿瘤筛查/液体活检常用样本
    尿液/痰液/唾液 非侵入性样本,适合筛查研究
    培养细胞/细胞系 适用于机制验证、靶点研究等

    七、实验案例简述

    ✅ 案例一:MGMT甲基化与化疗反应性分析

    • 样本:胶质瘤FFPE样本

    • 方法:TaqMan qMSP检测MGMT启动子区甲基化

    • 结果:甲基化阳性样本对替莫唑胺反应更好,具有良好预后价值

    ✅ 案例二:RASSF1A甲基化在乳腺癌中的表达特征分析

    • 样本:乳腺癌患者血浆cfDNA

    • 方法:SYBR Green qMSP

    • 结果:乳腺癌组显著高甲基化水平(p<0.01),有望作为早筛标志物

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    该产品被引用文献

    Kahn SL, Ronnett BM, Gravitt PE, Gustafson KS. Quantitative methylation-specific PCR for the detection of aberrant DNA methylation in liquid-based Pap tests. Cancer. 2008 Feb 25;114(1):57-64. doi: 10.1002/cncr.23258. PMID: 18181097; PMCID: PMC2648805.

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