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文献和实验人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
请参阅分析证书。 6. 将细胞以200 x g离心2分钟。去除并倒掉上清液。 7. 添加适量的培养基(例如,6孔板每孔1.5 - 2 mL)以准备培养容器。 8. 轻拍15 mL离心管,以使细胞沉淀脱离,然后轻轻加入1 mL适当的培养基,并接种到包被的6孔板的2个孔中(如果使用其他培养形式,或者如果分析证书另有说明,则相应加以调整)。请勿过度吸取细胞,否则会因为单细胞悬液的生成而造成细胞活力下降。 9. 轻轻左右和前后摇动板,以使细胞均匀铺展在整个孔中。 10. 建议在解冻后立即、48小时、以及约
要求: (1)环状光阑(Ring slit):装在聚光镜的下方,而与聚光镜组合为一体——相衬聚光镜。它是由大小不同的环形光阑装在一圆盘内,外面标有10X、20X、40X、100X等字样,与相对应倍数的物镜配合使用。 (2)相板(Phase plate):装在物镜的后焦平面处,它分为两部分,一是通过直射光的部分,为半透明的环状,叫共轭面;另一是通过衍射光的部分,叫“补偿面”。有相板的物镜称“相衬物镜”,外壳上常有“Ph”字样。 相衬镜检法是一种比较复杂的镜检方法,想要得到好的观察效果,显微镜的调试非常重要
,但如果需要,可以使用更浓缩的干细胞合格ECM凝胶。 3.将1.5 mL 1:80稀释的ECM凝胶基质(CC131)加入6孔板的每个孔中。 涡旋培养板,以使ECM凝胶基质均匀地铺展在板的表面上。 使用前,将其存放在2-8°C的冰箱中冷藏过夜或至少2小时。 如果不立即使用,用保鲜膜将ECM包被的培养板包好,并储存于2-8 °C下直至准备使用。应在3-4天内使用ECM包被的培养板。 4.在接种细胞之前,将板放回到室温下10-15分钟,除去包被溶液,然后每孔加入3 mL人ES/iPSC生长培养基(SCM130
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