微量蛋白质定量试剂盒 (BCA 法)

微量蛋白质定量试剂盒 (BCA 法)
产品描述：
              Bicinchoninic acid (BCA )法是近来广为应用的蛋白定量方法。其原理与Lowery法蛋白定量相似，即在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。BCA与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物，在562nm处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，据此可测定蛋白质浓度。与Lowery法相比，BCA蛋白测定方法灵敏度高，操作简单，试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳，并且受干扰物质影响小。与Bradford法相比，BCA法的显著优点是不受去垢剂的影响。
组成与储存：
(1) BCA Reagent  100ml，室温保存；
(2) Cu Reagent  2.5ml，室温保存；
(3) BSA standard  4mg/ml  1ml，−20ºC冻存。1.5年有效。
可进行500次微板(microplate)测定或100次1ml比色杯测定。  
所需设备：
               比色计、酶标仪、或微板比色仪，最佳工作波长562nm，可在540-590nm之间。
注意事项：
              1. 37ºC 30min或25ºC室温反应2小时对测量较为便利，但严格来讲此时反应尚未达到终点，通常每10min OD562值升高约2.3%。然而，通常在10min内可以测定30管而不明显影响测定精度；
2. 微量蛋白质定量试剂盒 (BCA法)检测范围为1~100µg/ml；
3. BCA法在样品含有脂类时光吸收值偏高。样品中EDTA或葡萄糖浓度大于10mM不能使用BCA方法，葡萄糖浓度大于10mM时可用改良Lowry法蛋白定量试剂盒#P1512，EDTA大于10mM的样品可用Bradford法蛋白质定量试剂盒(#P1510)。另外，蛋白质样品经液体样品蛋白抽提试剂(#P1255)沉淀后，可彻底去除干扰BCA法、Bradford法、和Lowry法蛋白测定的物质；
4. 欲使测量能耐受下面表2所提示的最大干扰物质浓度，并保持测量精度，应在蛋白标准管中加入相应浓度的干扰物质，但会给操作带来不便；
5. 可测量吸附于固相支持物乳酶标板、琼脂糖、亲和层系凝胶上的蛋白；
6. 每次测定应该制备单独的标准曲线。