Millonig缓冲福尔马林固定液（10%）

FFPE 样本前处理过程及注意事项

，也是最无法补救的一步。通常选用 10% 中性缓冲福尔马林 (ph 值 7.2-7.4) 进行固定，避免酸性或无缓冲福尔马林对核酸的降解。由于手术或活检组织很可能在手术过程中就已出现血氧供应不足，因此组织需要在离体后 30 min内尽快固定。 组织标本需要充分且适度的固定，固定不足导致深处组织未接触到福尔马林而出现核酸和蛋白质降解，过度固定又会导致组织内交联严重加大核酸提取难度。组织标本厚度、福尔马林溶液的体积、固定时间是影响固定程度的三个重要因素。 福尔马林大约以 2-3 mm/24 h 的速度穿透实体

三生三世，一场组化，一次豪赌

1. 标本固定——不仅仅是「切一切」和「泡一泡」温柔地取材：大刀阔斧取材的同时，视组织如珍宝，莫挤压组织，轻柔取材和镊取。尽量避开坏死区域。太大太厚的组织不利于均匀一致的固定，实质组织取材厚度应小于 5 mm。新鲜的固定液： 固定液 10% 中性缓冲福尔马林 (NBF) 需新鲜配置，商用型固定液注意其标注的有效期，避免使用过期变质的固定液。充分及时地固定：固定液要充足，其与组织的体积比最好大于等于 20 倍；取材后即刻固定。固定时需将瓶口封住，避免甲醛挥发。组织的固定时间不宜过长，一般过夜（12～24

石蜡切片制备（取材与固定、水洗、脱水、透明、包埋）

取材与固定 切取组织时应使用锋利的刀、剪，切取组织块时，从刀的根部开始向后拉动切开组织。组织块的厚度约为0.2~0.3cm，大小为1.5cm x 1.5cm x 0.3cm为宜。取好的组织块用10%缓冲中性福尔马林（甲醛）液固定24~48h。 10&福尔马林（甲醛）：100ml甲醛+900ml水。 10%缓冲中性福尔马林（甲醛）液：100ml甲醛+900ml水+4gNaH 2 PO 4