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99
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爱必信(上海)生物科技有限公司
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50mL×2
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文献和实验碱性磷酸酶(ALP)是成熟成骨细胞的标志性酶,同时成骨细胞形成的钙结节也是成骨细胞的标记物。 以ALP为目标物的检测方法: 1 Gomori钙钴法 【染色原理】 ALP在pH值9.4的环境下,以镁离子作为激活剂,能够把β-甘油磷酸钠水解出磷酸,磷酸与高浓度的钙盐结合形成无色的磷酸钙,再与硝酸钴作用形成磷酸钴,经硫化胺处理形成黑色的硫化钴沉淀在酶活性处。 【孵育液配制】 3%β-甘油磷酸钠5ml 2%巴比妥钠5ml 蒸馏水10ml 2%
分别为0.3%双氧水和0.3%Triton X-100混合而成。配制方法是先用微波加热的36 ml PBS,再接着加120 ul Triton X-100,并加热一会儿,冷却至临用前加0.4 ml 30%H2O2。4、5%羊血清或封闭血清,用PBS稀释。5、含0.03%H2O2的0.05%DAB(避光):用20×DAB(1%,10 mg/ml)5 ul+0.1 ul 30% H2O2+95 ul PBS。6、一抗用PBS稀释(也可用抗体稀释液),二抗用中杉金桥的SP染色试剂盒。7、Xylene、梯度
免疫组化技术已经渗透到医学研究的各个领域,它在蛋白抗原的细胞准确定位上是其它蛋白检测方法无与伦比的。然而,要做好一张漂亮的染色切片,也不是十分容易的事。 我做免疫组化方面的实验多年,积累了很多经典案例。下面我把这些案例列举出来,并附上我们发现的问题以及如何解决这些问题的解决方法,以供大家实验参考和实验交流。 实验背景 以前做免疫组化,我一直用中杉金桥的 SP 三步法染色试剂盒,效果不错。在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验。第一批组化实验结果很好
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