DMEM/F-12无糖培养基（含L-谷氨酰胺，不含HEPES

类器官培养与应用——结直肠类器官

缓慢滴加 650μl 预热的类器官培养基，确保基质胶被完全覆盖。放于 37℃，5%CO2 的培养箱中培养，每 2-3 天更换培养基（用于换液的类器官培养基内不含 Y27632)。   类器官传代 14、吸出类器官培养液，机械分离 Matrigel，然后加入 500μl 胰蛋白酶，放置于 37℃ 培养箱中孵育 1-2min 后，用移液器多次吹打，从基质胶中释放类器官。 15、用含有 10%FBS 的 DMEM/F12 培养基终止消化，在 4℃ 条件下 300g 离心 5min。 16、用冷 PBS

细胞转染的步骤你了解多少？

1mmol/L Hepes液中，加H2 O至10mL过滤除菌4℃保存。 (5)G418选择培养基：用含10%胎牛血清的DMEM培养液配制G418，G418浓度为200～ 800mg/L 注意：对受体细胞先做预试验，选用浓度为在10～14天内能杀死细胞50%以上的最低浓度。 2. 操作步骤 (1)供体DNA制备：方法按前介绍的DNA提取法提取，溶于TE中，40mg/L。 (2)受体细胞的培养：研究癌基因转移应选择不含人类Alu序列的动物细胞系作为受体细胞。如小鼠NIH3T3胚成纤维

细胞培养基的使用方法（微孔滤膜过滤除菌）

性，一般与激素或其它物质起相互协同或加成作用。另一种常见的添加物就是血清替代物，目前已有许多可完全或部分替代传统培养液中血清成分的商业产品，其稳定性较好，但批次间仍有差别，产品的成分也不很确定。2、细胞培养基配制 2.1 干粉培养基原倍液的配制 1）配制过滤除菌的细胞培养基 1）阅读培养基使用说明，确定需要添加何种添加剂（如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等）。 2）根据所需将培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水至总体