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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 供应商:
爱必信(上海)生物科技有限公司
- 规格:
125mL
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文献和实验首先,从细胞的培养过程下手。外泌体来自细胞,因此必须先从源头抓起。大部分的细胞培养过程中都是带有血清的,无论是牛血清、马血清等都是含有异源外泌体的,而我们研究的目标通常是细胞所分泌的外泌体,因此需要尽可能的去除这些异源外泌体的干扰。那么我们需要怎么做呢? 这里需要了解一个大原则:在细胞正常生长的条件下,尽可能的减少血清外泌体或者不使用血清。方法一,可以通过超速离心的方法去除血清中外泌体。方法二,通过外泌体专用无血清培养基来替代完全培养基,维持细胞
等基础培养基),该培养基中没有促使细胞贴壁的因子。外泌体专用培养基可以维持细胞一定时间的生长,但无法替代完全培养基,也很难达到完全培养基的效果。 Q: 其他细胞能否用外泌体专用无血清培养基? A:现已有用户将该培养基用于除肿瘤细胞和 T 细胞外的其他细胞并发表文章。保险起见,建议您在正式实验前先预实验检测实验细胞是否能在外泌体专用培养基中正常生长增殖。因为外泌体专用培养基不适用于传代细胞培养,无促细胞贴壁因子,如果实验细胞不适应外泌体专用培养(营养成分不足,增殖不显著),则可选择去外泌
可以适当提高冻存液中的血清浓度; 很多原代细胞的体外培养需要加入生长因子,细胞才能正常生长增殖和分化; 理论上,在显微镜下可以观察到梭形的细胞说明传代培养成功。和原代培养的观察类似。但是总的来说,我们实验室的实验结果不是很好,观察到的好的细胞很少,其原因可能和原代培养时候的相近; 细胞增殖分化缓慢:有些原代细胞体外培养需要加入生长因子,细胞才可正常增殖和分化,因而,实验前要根据具体细胞配置相应培养基; 细胞污染:细胞污染类型分为物理污染、化学污染以及生物污染,因而原代培养要严格无菌操作,培养基专用专配
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