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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 供应商:
爱必信(上海)生物科技有限公司
- 规格:
125mL
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文献和实验首先,从细胞的培养过程下手。外泌体来自细胞,因此必须先从源头抓起。大部分的细胞培养过程中都是带有血清的,无论是牛血清、马血清等都是含有异源外泌体的,而我们研究的目标通常是细胞所分泌的外泌体,因此需要尽可能的去除这些异源外泌体的干扰。那么我们需要怎么做呢? 这里需要了解一个大原则:在细胞正常生长的条件下,尽可能的减少血清外泌体或者不使用血清。方法一,可以通过超速离心的方法去除血清中外泌体。方法二,通过外泌体专用无血清培养基来替代完全培养基,维持细胞
) mimics,经检测在人类、小鼠、大鼠中均无同源片段,最大限度降低了对定量实验造成的干扰,适用于内参表达不稳定的外泌体或暂未发现合适内参的其他样品,对目的 microRNA 进行相对定量。外参序列:ucaccggguguaaaucagcuug。cel-miR-39-3p外参正序列为 AACACGCTCACCGGGTGTAA。 18、外泌体专用培养基是否可用于重悬、接种以及继续培养细胞? A:不可以。外泌体专用培养基不含促细胞贴壁的因子,可以维持已贴壁的细胞一定时间内的生长,无法替代完全培养基长期
可以适当提高冻存液中的血清浓度; 很多原代细胞的体外培养需要加入生长因子,细胞才能正常生长增殖和分化; 理论上,在显微镜下可以观察到梭形的细胞说明传代培养成功。和原代培养的观察类似。但是总的来说,我们实验室的实验结果不是很好,观察到的好的细胞很少,其原因可能和原代培养时候的相近; 细胞增殖分化缓慢:有些原代细胞体外培养需要加入生长因子,细胞才可正常增殖和分化,因而,实验前要根据具体细胞配置相应培养基; 细胞污染:细胞污染类型分为物理污染、化学污染以及生物污染,因而原代培养要严格无菌操作,培养基专用专配
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