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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 供应商:
爱必信(上海)生物科技有限公司
- 规格:
500mL
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文献和实验转印夹,注意 PVDF 膜与胶,PVDF 膜与滤纸,滤纸与胶之间不可有气泡。 2) 转印槽加满转膜缓冲液,插入电转印夹,将转印槽放入冰水中,确保 PVDF 膜靠近正极,带负电的氨基酸和蛋白质向正极迁移。 3) 转膜选择恒流,每个转印槽建议电流为 150-300 mA,时间依据目的蛋白条带分子量大小做适当调整。 4) 转膜结束后,将 PVDF 膜置于丽春红染色液中,室温 5-10 分钟即可见红色条带,用洗涤缓冲液洗数次可洗掉红色条带进行后续实验 。 封闭 1) 漂洗印迹膜:使用洗涤缓冲液室温适当漂洗
1、试剂耗材的准备:(1)转膜缓冲液(48 mM Tris-HCl,39 mM 甘氨酸,0.037% SDS,20%甲醇):(2)10 × 丽春红染液:(3)TBS 缓冲液:(4)TBST 缓冲液(含20%Tween20 的TBS 缓冲液):(5)封闭液(含5%脱脂奶粉的TBST 缓冲液):(6)一抗、二抗及抗体稀释液:参照说明书,以封闭液或TBST 进行稀释。(7)底物显色液ECL,4℃ 避光保存,现用现配。(8)显影液和定影液用水稀释10 - 20 倍于铝盒中,可多次使用。室温避光存放
。 4、培养细胞时,如何去除血清来源的外泌体? 多数情况下,细胞在体外培养时需要血清,而血清中一般都含有外泌体,为避免血清对细胞外泌体的污染,可采用以下两种方法: 将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 >10 h 以去除血清外泌体; 选择无血清完全替代培养基进行细胞培养。 5、无外泌体血清(或者外泌体专用培养基)在什么时候使用? 使用无外泌体血清培养基:细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后,细胞汇合度在60% - 70% 时,移去原有含血清的培养基,换成新鲜的无外泌体血清培养基,继续
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