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- 2025年07月13日
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- 文献和实验
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爱必信（上海）生物科技有限公司
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文献和实验［原理］ 在动物胰脏中除了存在胰蛋白酶外，还有另外两种与胰蛋白酶性质相似的蛋白水解酶：胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶。在胰蛋白酶提取过程中，三者彼此很难分开。需采用合适的方法进一步分离纯化。 从动物胰脏中提取胰蛋白酶，一般是用稀酸将胰腺细胞中含有的胰蛋白酶原提取出来，然后根据等电点沉淀的原理将提取液的pH值调至酸性（pH3.0左右），使大量的酸性
问：小弟要做蛋白酶体抑制剂筛选相关的工作，在dxy上看了前辈的不少文章，先谢谢大家了。不过我还是有些不了解： 1、大家做蛋白酶体相关实验时，蛋白酶体需要纯化吗？一般怎么纯化？ 2、做蛋白酶体抑制剂的筛选相关步骤。 3、大家有没有谁做过蛋白酶体的表达的，亚基也行。 答：你去找一套叫 Methods in Enzymology的书，在 Volume 398 的PartB应该有你需要的东西。 Table of Contents-B.pdf
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中纯化得到。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以，蛋白酶k消化过程中通常加入edta（以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用
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