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99
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爱必信(上海)生物科技有限公司
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25mg
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文献和实验,首先第一个Fmoc氨基酸通过一个酸性接头接到不溶载体树脂上,Fmoc去保护通过用碱处理树脂来完成,一般是Poperidine。 用预先激活或原位激活连接第二个Fmoc氨基酸。要求总多肽合成后,通过TFA分离来除去树脂和去保护。 Fmoc分离 固相多肽合成中多肽分离主要用酸解 Fmoc法用弱酸,比如TFA或TMSBr。各种添加剂, 一般为thiol compound , 水和酚,用来保护多肽的免分离中Carbocation的破坏。 下列保护基与TFA和TMSBr分离相合
生物素-亲和素系统的特点 生物素(biontin,B)广泛分布于动、植物组织中,常从含量较高的卵黄和肝组织中提取,分子量244.31kD.生物素分子有两个环状结构(图 11-1),其中Ⅰ环为咪唑酮环,是与亲和素结合的主要郎部位;II环为噻吩环,C2上有一戊酸侧链,其末端羧基是结合抗体和其他生物大分子的惟一结构,经化学修饰后,生物素可成为带有多种活性基团的衍生物——活化生物素(图1)。亲和素(avidin,AV)亦称抗生物素蛋白、卵白素,是从卵白蛋白中提取的一种由4个相同亚基组成的碱性
/0.5%TFA 溶液数次,然后用0.1%TFA平衡 2.用200ul 0.1%TFA 将冻干样品复溶 3.用ZipTip 吸入压出复溶液大约10次左右 4.用0.1%TFA 冲洗 5.先用Tris-HCl Buffer(50mM/L PH 8.2)冲洗ZipTip,然后用ZipTip缓慢吸入2.55mg/ml SPITC (Tris-HCl Buffer配制),然后50℃ 水浴 1h 6.取出ZipTip,将多余试剂用0.1%TFA 冲洗干净,衍生后的样品用2.5ul 80%ACN/0.5%TFA
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