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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温,12个月
- 库存:
现货
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
500ml
用途:磷酸缓冲液之一,多用作ELISA清洗液
注意事项:主要由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠、Tween20等组成。
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文献和实验。 抗体孵育 吸水纸吸掉封闭液,不洗,每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒,4 ℃ 孵育过夜。 加荧光二抗: PBST 浸洗爬片 3 次,每次 3 min,吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗,湿盒中 37℃ 孵育 1 h,PBST 浸洗爬片 3 次,每次 3 min。 注意:从加荧光二抗起,后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。 固定拍照 复染核:滴加 DAPI 避光孵育 5 min,对标本进行染核,PBST 5 min×4 次洗去多余的 DAPI。 用吸水
:蛋白质样本和生物素标记的蛋白marker标准经SDS-PAGE后转于印迹膜上,然后经一抗→HRP 标记的二抗→HRP催化LumiGLO试剂发生反应并产生荧光→显影于X-光片上。其基本原理如下图: 3.1 主要试剂配制 10×转移缓冲液(transfer buffer):30.3 gTris-Base,144.1 g Glycine,500 ml三蒸水,振荡混匀后,定容至1000 ml,4℃备用。用时用0.1 M磷酸缓冲液即1×PBS和甲醇稀释至1倍,使甲醇的终浓度
抗体法——直接法 将酶直接标记在一抗上,然后直接与相应抗原特异地结合。形成抗原-抗体-酶复合物,最后用底物显色剂显色。 (2) 酶标抗体法——间接法 *将酶标记在二抗上,先将一抗与相应的抗原结合,形成抗原抗体复合物,再用二抗(酶标抗体)与复合物中的特异抗体结合,形成抗原-抗体-酶标抗体复合物,最后用底物显色剂显色。 (a) 酶标抗体间接法的操作步骤 *标本准备: -石蜡脱蜡至水; -冰冻切片浸入4°C丙酮固定10min,0.01M PBST漂洗,5min×3; -细胞
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