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人结肠癌细胞带荧光素酶 HT-29+LUC(STR鉴定正确)

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  • 2025年07月15日
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    • 供应商

      SHCC

    • 运输方式

      干冰/常温

    • 年限

      10年

    • 生长状态

      贴壁/悬浮

    • 规格

      1*10^6cell/T25

    种属

    别称

    HT-29+LUC

    组织来源

    结肠

    疾病

    结肠直肠腺癌

    传代比例/细胞消化

    1:2传代,消化3-5分钟

    完全培养基配置

    McCoy’s 5A培养基;10%胎牛血清;1%双抗

    简介

    HT-29细胞是由J·Fogh在1964年用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离的;近来,已建株的培养细胞用含相同血清McCoy's5A培液培养。HT-29细胞在裸鼠中致瘤,也能在类固醇处理的地鼠中致瘤。

    形态

    上皮细胞样

    生长特征

    贴壁生长

    倍增时间

    ~40-60h

    受体表达

    human adrenergic alpha2A, urokinase receptor (u-PAR), vitamin D (moderate expression), urokinase receptor (u-PAR); vitamin D (moderate expression), human adrenergic alpha2A

    基因表达

    secretory component of IgA; carcinoembryonic antigen (CEA); transforming growth factor beta binding protein; mucin, myc+; ras+; myb+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, Blood Type A; Rh+; HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, HT-29 cells are negative for CD4, but there is cell surface expression of galactose ceramide (a possible alternative receptor for HIV).

    致瘤性

    Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade I); tumors also form in steroid treated hamsters.

    STR

    Amelogenin: X CSF1PO: 11,12 D13S317: 11,12 D16S539: 11,12 D5S818: 11,12 D7S820: 10 TH01: 6,9 TPOX: 8,9 vWA: 17,19

    培养条件

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    冻存条件

    冻存液:90%FBS,DMSO 10%,

    或使用非程序冻存液:官网货号SH-H040

    备注

    该细胞是通过慢病毒转染荧光素酶的稳转株,收到细胞传代8代左右后,若要求需要维持荧光强度,建议可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。

    产品使用

    仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。


    细胞培养操作
    1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
    3. 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
    a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
    b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
    c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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    产品细节图片1

    细胞  新模板2_01.jpg细胞  新模板2_02.jpg细胞  新模板2_03.jpg细胞  新模板2_04.jpg细胞  新模板2_05.jpg细胞  新模板2_06.jpg细胞  新模板2_07.jpg细胞  新模板2_08.jpg


           

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