- ￥171
- 丽山生物
- E0070-50
- 济南
- 2026年04月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 英文名：
LSfast™ SphI
- 保质期：
2年
- 供应商：
山东丽山生物科技有限公司
- 保存条件：
﹣20℃
- 规格：
50 rxns
产品介绍
5'...G C A T G ↓ C...3'
3'...C ↑ G T A C G...5'
LSfast™ SphI 快速内切酶可识别GCATGC位点，并使用通用 LSfast™ 缓冲液于 37°C 下在 5–15 分钟内的切割效果最佳。
同裂酶：PaeI。
产品组成
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组分 |
规格 |
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LSfast™ SphI |
50 μl |
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10× LSfast™ Buffer |
1 ml |
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10× LSfast™ Color Buffer |
1 ml |
建议反应条件
1× LSfast™ 缓冲液；
37℃温育；
参照“DNA 快速酶切流程”配制反应体系。
失活条件
80℃温育20 min。
甲基化敏感性
对于被 EcoBI 甲基化的 DNA，剪切可能受阻。
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文献和实验常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)（BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等） 在分子克隆实验中，限制性内切酶是必不可少的工具酶。 无论是构建克隆载体还是表达载体，要根据载体选择合适的内切酶（当然，使用T载就不必考虑了）。先将引物设计好，然后添加酶切识别序列到引物5' 端。常用的内切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI
):5’―GCATGCGCGCGGCCGGGGAGGCC 含Sac∏,SphI,NotI和SfiI位点。 （5） 电泳鉴定扩增产物； （6） 特异限制性内切酶消化,克隆,转化宿主细胞,序列分析,表达研究等。 PCR第一循环中DNA合成是由anchor-poly(dC)引物(ANpolyC) 和5’端引物引导合成。Anchor的加入有两个作用:一是限定3’末端,防止PCR过程中3’末端可能沿同聚物尾不断的延伸;再则增加酶切位点或其他序列信息,利于基因克隆等操作。锚定-PCR对于分析免疫球蛋白、TCR甚至未知序列基因
了一种新技术COMPARE-MS，该法将MBD柱层析法与MS-RE联用，互补了各自单用的弊处，能够快速、敏感的检测DNA甲基化情况，可用于临床标本检测，作为早期诊断和肿瘤分级的依据[56]。其过程是：用非待测区的内切酶和甲基化敏感的限制性内切酶同时消化DNA片段，随后通过MBD柱捕获，保留了含有甲基化区的片段，最后通过实时PCR扩增定量分析（见图9）。 图9：联合甲基化敏感性限制性内切酶的MBD（COMPARE-MS）示意图。用甲基化以外的位点的内切酶（A酶）与甲基化敏感的内切酶（B酶）联用
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