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- 和序生物
- HX-1310
- 中国
- 2026年02月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Human Choroid Plexus Epithelial Cells
- 生长状态：
上皮样
- 运输方式：
常温
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 物种来源：
人
人脉络丛上皮细胞描述:
脉络丛上皮细胞是构成神经系统和血液之间的选择性屏障的结构基础，能分泌脑脊液进入脑室。脉络丛上皮细胞表达 nei向整流的阴离子通道，这些阴离子通道在脑脊液的分泌过程中起着重要的作用。脉络丝表皮细胞合成和分泌许多生长因子和肽类，这些物质对于脑血管系统的受损区域有营养功能。例如，中枢神经系统在受到缺血和创伤损伤后，脉络丛中许多生长因子的表达将上调。脉络丛中多种生长因子受体使得可以通过自分泌和旁分泌的作用调控愈合过程。脉络丛上皮细胞的培养被广泛用于评估其生理学和形态学特性，并可做为体外模型研究有机阳离子通过血脑屏障的细胞机理。 人脉络丛上皮细胞(HCPEpiC)提取于人脉络丛组织，提取纯化之后立即冻存。
细胞复苏步骤
一、所需仪器：
离心机
生物安全柜
电动移液器
- CO
2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
恒温水浴锅
二、所需试剂：
胎牛血清（
- FBS
）
无菌
- 1×PBS pH=7.2
完全培养基
三、所需耗材：
离心管（
- 15ml
、50ml）
- T-25
细胞培养瓶
一次性无菌移液管（
- 2ml
、5ml、10ml）
四、操作步骤：
-
- 将恒温水浴锅中的水预热到37℃；
- 从液氮罐中取出要复苏的细胞，尽快转入恒温水浴锅中复温，工程中需要不断震荡冻存管以提高复温速率；
- 将融化了的冻存管中的用移液管转入一直装有5ml完全培养基的15ml离心管中，充分混匀后，300g离心5min；
离心完成后弃去上清，用
- 1ml
完全培养基重悬细胞后，转入T-25细胞培养中，再加完全培养基4ml，之后转入CO2培养箱中培养静置。
细胞冻存步骤
一、所需仪器：
-
- 86℃
超低温冰箱
离心机
生物安全柜
电动移液器
- CO
2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
二、所需试剂：
胎牛血清（
- FBS
）
细胞培养级
- DMSO
冻存液：
- 80%FBS+20%DMSO
无菌
- 1×PBS pH=7.2
消化液：
- 0.25%
胰蛋白酶+0.02%EDTA
- isopropanol
三、所需耗材：
离心管（
- 15ml
、50ml）
- T-25
细胞培养瓶
一次性无菌移液管（2ml
、5ml、10ml）
- 1.8ml
冻存管
程序降温盒
四、操作步骤：
-
- 将需要那冻存的细胞从CO2培养箱中取出，在生物安全柜内，打开培养瓶瓶口，吸弃瓶内的培养基；
- 向培养内加入无菌1×PBS 3ml，之后水平放置培养瓶，旋转震荡培养瓶，使PBS能够浸润到培养平面上所都的面积，吸弃PBS；
- 重复步骤2一次，之后向瓶内加入消化液1ml，轻微震荡后放入37℃CO2培养箱中孵育2-4min；
- 孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起，如还有部分细胞为消化下来，可在生物安全柜内用移液管吸起消化液，吹打培养平面；
- 向消化下细胞的培养瓶中加入1ml含血清的完全培养基终止消化，然后将培养瓶中的液体转入15ml离心管中，300g离心5min；
- 离心完成后，弃上清，用0.5mlFBS重悬细胞，再加入0.5ml冻存液，用移液管充分混匀，之后转入1.8ml冻存管中；
- 将冻存管转入填充满isopropanol的程序降温盒中，之后转入-80℃冰箱中过夜降温；
- 8.
第二天，取出降温完成的序降温盒中的冻存管，尽快转入液氮罐中保存。
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文献和实验PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长，既有上皮样细胞又有纤维样细胞，纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时，为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性，要求采用单一种类细胞来进行实验，这样才能对某一细胞的功能、形态等变化进行一系列研究，因而培养细胞的纯化就成为实验研究的重要一步，甚至需要从混杂的细胞群中分离出单个细胞来进行培养和开展实验研究。一、原代
原代 肺泡上皮 细 胞 （ Primary Alveolar Epithelial Cell s ） 的体外分离培养 1 、完全无血液残留肺 脏组织 2、消化肺 组 织 ：常用细胞消化酶：胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。经支气管将酶灌注到完整的肺中消化，或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3 、分离 纯 化 细 胞 ：原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法：（1）密度梯度离心法：密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同，在密度梯度离心中细胞所处的位置也相应不同
③ 用PBS液洗去黏附在晶状体表面的虹膜色素及玻璃体。弃去洗液； ④ 将晶状体的凸面向下，用4号针头于晶状体赤道部稍靠后的部位环刺一圈，然后用两把无齿显微镊子轻轻分离出晶状体前囊膜； 2. 原代培养； ① 取下晶状体前囊膜后，一般不经洗涤。将其剪成余额1.5mm×1.5mm的植块； ② 用无齿显微镊子挑起植块，平贴于培养板中； ③ 置于37℃恒温箱中约5min，待组织块稍干后便可加入培养液； ④ 按常规方法培养。每周换培养液2次，每次更换2/3的培养液量； 3. 传代
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