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- Yuanmu
- F4720
- 2025年07月11日
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产品名称：HRP标记高敏兔鼠通用二抗
产品规格：6ml
储存温度：2~8℃保存，有效期12个月。
预期用途
在免疫组化反应或原位杂交反应中不要抗原抗体结合，通过染色，将靶点进行标记。
检测原理
本试剂基于免疫组织化学检测原理：切片经抗原热修复后不一抗试剂进行孵育，在原位形成一抗不目标抗原的抗原-抗体复合物；抗原-抗体复合物中一抗分子再不辣根过氧化物酶（HRP）标记的聚合物二抗通过孵育结合，在原位进一步形成抗原-抗体-二抗聚合物的复合物；后通过HRP催化二氨基联/苯胺（DAB）在抗原部位形成棕色沉积物。光学显微镜下通过观察棕色部位来确定是否有目标抗原及其表达情况。主要组分Polymer-HRP羊抗鼠/兔二抗试剂；二抗稀释液。
使用方法
1、常觃处理石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等待检测样品，至水化步骤；
2、切片充分甩干后加内源性过氧化物酶阻断剂50-100 ul，湿盒中室温孵育30分钟；或者浸泡在内源性过氧化物酶阻断剂中15-30分钟；
3、PBST浸洗3分钟，重复1-2次；
4、滴加适量一抗工作液（商品化即用型抗体或适当比例稀释的浓缩抗体），按实验要求孵育；
5、PBST浸洗5分钟，重复3-5次；
6、切片充分甩干后加Polymer-HRP羊抗鼠/兔二抗试剂50-100 ul（约1滴），湿盒中室温孵育30分钟；
7、PBST浸洗5分钟，重复3-5次；
8、DAB或者AEC显色（根据DAB或AEC显色试剂盒操作说明）；
9、复染、脱水、透明、封片、镜检。
注意事项
1.不能用于组织切片封片的透明。
2.用作组织块的透明剂及组织切片的脱蜡剂时，均需根据使用频次和时间定期更换，以免影响透明和脱蜡效果。
3.环保型透明脱蜡液冬天温度较低可能会影响脱蜡效果，建议加热到37℃进行脱蜡。
4.操作时请穿实验服，并佩戴一次性手套。
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文献和实验刺法用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水，在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下，在受刺部位留有一黑色标记。该法适用于大小鼠、豚鼠等。在实验动物数量少的情况下，也可用于兔、狗等动物。（四）打号法用刺数钳（又称耳号钳）将号码打在动物耳朵上。打号前用蘸有酒精的棉球擦净耳朵，用耳号钳刺上号码，然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。该法适用于耳朵比较大的兔、狗等动物。（五）号牌法用金属制的牌号固定于实验动物的耳上。大动物可将号码烙压在圆形或方形金属牌上（最好用铝或不锈钢的，它可长期使用不生锈），或将号码按实验
被单抗的微孔中依次加入 高敏 C 反应蛋白（ hs-CRP ） ，再与 HRP 标记的 hs-CRP 抗体结合，形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 高敏 C 反应蛋白（ hs-CRP ） 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），通过标准曲线计算样品中 人高敏 C 反应蛋白（ hs-CRP ） 浓度。 试剂盒组成
试剂及配制 1. HRP和兔（或羊）抗HRP：抗HRP用HRP免疫兔（或羊）获得。 2. 0.075mol/L醋酸钠-0.15 mol/L醋酸铵等量混合液 3. 0.1mol/LHCl和0.01mol/LHCl 4. 饱和硫酸铵溶液 5. 0.01mol/L NaOH 操作方法 1. 取兔（或羊）抗HRP血清5ml，16000r/min离心20min，去沉淀； 2. 于收集的上清中加入HRP(2mg/ml)溶液1ml，室温缓慢搅拌1h，同上离心；
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
