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产品名称:抗荧光淬灭封片剂(干固型)
产品规格:10ml
储存温度:常温运输。4℃避光保存,有效期36个月。
产品描述
抗荧光淬灭封片剂是一种能够减缓荧光淬灭并且固化玻片从而形成永久硬密封的试剂,固化后的玻片无需使用指甲油或其他密封剂密封盖玻片的边缘;含DAPI的抗荧光淬灭封片剂可直接进行细胞核染色。
使用方法
1.细胞样品
(1)染色完毕后,吸掉液体。
(2)每个玻片上滴加10-20μL的封片剂,盖上贴有细胞的盖玻片,让细胞接触到封片剂,盖上盖玻片时可以挤出多余的封片剂,尽量不要有气泡。
(3)荧光显微镜观察。
(4)观察结束后,放置4℃或室温,过夜封片,注意避光。
2.组织切片
(1)染色完成后,吸掉染色液。
(2)滴加10-20μL的封片剂于组织切片上,盖上盖玻片,让切片充分接触封片剂,盖上盖玻片时可以挤出多余的封片剂,尽量避免气泡产生。
(3)荧光显微镜观察组织切片。
(4)观察结束后,放置4℃或室温,过夜封片,注意避光。
3.其他样品
其他样品可参照上述样品进行操作。
注意事项
1.本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等域。
2.使用将其恢复至室温,轻微震荡混匀,避免产生气泡。
3.本产品对于染色活细胞膜染料和线粒体染料的抗淬灭效果不佳,建议用于固定透化的细胞或者组织。
4.可能会不适用于某些染料,实验建议进行预实验测试匹配性。
5.封片过程中,应避免湿气太重的地方,封片剂吸入太多水汽,会影响封片效果。
6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验。 7. 光漂白 减少照明强度/时间。 选用抗荧光淬灭封片剂。 二、背景太高了怎么办? 大家在操作时可以通过设置对照,帮助我们迅速判断背景的来源。对照包括自发荧光对照(无一抗、二抗)和无一抗对照。 1. 封闭不足 选用二抗种属来源的血清封闭。 选用链霉亲和素/生物素系统,需要用链霉亲和素封闭内源的生物链酶。 选用HRP系统,需要使用过氧化氢等商业化试剂盒去活化内源性HRP。 选用AP系统,需要使用左旋咪唑等商业化试剂去活化内源
添加过抗还原剂。其实,检验ECL是否失效的方法很简单,取稀释的即用型二抗1-2ul加至ECL混和液中观察荧光强度,即可知道ECL是否失效。 商品化的ECL价格并不便宜,因此ECL孵育的最佳方案是:将ECL滴加在保鲜膜上或干净的支持物上,如废弃的旧底片、塑料盒,有机玻璃盒等等(注意,国产的保鲜膜很多质量不过关,有两种潜在的问题,下面详述),然后倒扣膜于保鲜膜上,夹住一个角来回拖动数次至ECL均匀(有的产品说明书要求孵育1min)。另外平铺一张干净的保鲜膜,将膜揭下控干ECL、倒扣包好,然后显影
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