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- Yuanmu
- F4710
- 2025年07月15日
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产品名称：免疫组化试剂盒（兔）
产品规格：50T，100T
储存温度：-20℃ , 一年有效
本产品仅限于业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
原理：DAB染色液是特别敏感的二步法免疫组化试剂盒，适合与兔或鼠源一抗配用。其主要过程为，一抗与切片中的靶抗原形成抗原抗体复合物，酶标羊抗鼠/兔IgG聚合物二抗(以多聚葡聚糖分子为骨架，辣根过氧化物酶与羊抗鼠/兔IgG形成的聚合物)与抗原抗体复合物中的一抗结合，再利用辣根过氧化物酶催化二氨基l苯a(DAB)在抗原部位形成棕色显色。
试
剂盒组成：酶标羊抗兔/抗鼠IgG聚合物二抗4℃，5mL;DAB显色剂(100x)A4℃，100ul;DAB显色缓冲液B4℃，10mL;3%过氧化氢，10mL;
使用方法：DAB显色缓冲液：DAB显色剂(100x)=100:1;DAB显色工作液液C=A+B;
其他自备试剂：修复液，pbs，BSA等
操作流程如下(仅供参考)：
石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲bⅠ15min-二甲bⅡ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸馏水洗。
抗原修复：组织切片置于盛满EDTA抗原修复缓冲液(PH8.0)(其他抗原修复液可以根据情况选择)的修复盒中于微波炉内进行抗原修复，中火8min至沸，停火8min保温再转中低火7min，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。自然冷却后将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
阻断内源性过氧化物酶：切片放入3%过氧化氢溶液(30%双s水：纯水=1:9)，室温避光孵育25 min，将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
非特异性封闭:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈(防止抗体流走)，在圈内滴加用3%BSA或者用封闭液均匀覆盖组织，室温封闭30min。
加一抗：轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗工作液(可选择PBS或者一抗稀释液配制一抗工作液)，切片平放于湿盒内4°C孵育过夜。(湿盒内加少量水防止抗体蒸发)
加二抗：玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的酶标羊抗鼠/兔IgG聚合物二抗覆盖组织，室温孵育50min。
DAB显色：玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加新鲜配制的DAB显色工作液液C，显微镜下控制显色时间，阳性为棕黄色，自来水冲洗切片终止显色。
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