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7.5M Ammonium acetate Solution(RNase free)
- CAS号:
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- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- 保存条件:
Store at 2-8℃,1 year
- 规格:
100ml
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响,相关处理只限于产品本身,不涉及其他赔偿。
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文献和实验溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。 10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套) 5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml
5.7.3 在离心管中按下列顺序加入以下溶液: 10×Buffer 2.5 ul dNTP Mixture 2.5 ul 111 TBq/mmol[a-32P]dCTP 5 ul Exo-free Klenow Fragment 1 ul 5.7.4 混匀后(25ul),37°C下反应30分钟。短暂离心,收集溶液到管底。 5.7.5 65°C加热5min使酶失活。 5.8 探针的纯化及比活性测定: 5.8.1 准备
A260/280 ratio 6. 加适量Rnase-free water 溶解RNA沉淀,用枪头反复吸取混匀,55-60 ℃水浴10-15 min。进行下游实验或-70 ℃保存备用。 7. RNA可进行mRNA分离,或贮存于70%乙醇并保存于-70 ℃。 预计的总RNA产量: [注意] 1. 整个操作要带口罩及一次性手套,并尽可能在低温下操作。另外,提取上清这步一定要小心,靠近沉淀的部分一定要舍得不要,要不然会有蛋白质污染,影响比值 2. 加氯仿前的匀浆液可在-70 ℃
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