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- 2025年07月14日
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北京索莱宝科技有限公司
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1EA
转膜滚轮适用于Western 实验的转膜步骤，能够快速去除胶和膜以及滤纸之间的气泡，不会对胶及膜产生影响，从而提高转膜效率。
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文献和实验相关专题Western 免疫印迹（Western Blot） Western 免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。 为利于更好的实验效果，不同蛋白，转膜条件略有不同，迪申生物技术（上海）有限公司专注于生产免疫组化相关产品多年，对 WB 实验有一定了解，今天跟各位同学一起分享下实验过程中发现的不同蛋白的转膜条件。
1、试剂耗材的准备：（1）转膜缓冲液（48 mM Tris-HCl，39 mM 甘氨酸，0.037% SDS，20%甲醇）：（2）10 × 丽春红染液：（3）TBS 缓冲液：（4）TBST 缓冲液（含20%Tween20 的TBS 缓冲液）：（5）封闭液（含5%脱脂奶粉的TBST 缓冲液）：（6）一抗、二抗及抗体稀释液：参照说明书，以封闭液或TBST 进行稀释。（7）底物显色液ECL，4℃ 避光保存，现用现配。（8）显影液和定影液用水稀释10 - 20 倍于铝盒中，可多次使用。室温避光存放
易溶解。4) 室温敞开管子放置 30 分钟以让丙酮挥发完全。5) 1X SDS 上样缓冲液溶解沉淀，然后 WB 检测。WB 步骤中需注意处1) 使用 16.0%Tris-Glycine 胶或 4-20% 的梯度胶电泳。2) 对于活化的 IL-1β，转膜时不要转膜过度而导致丢失。建议使用 0.2um 孔径的膜。 若是湿转，CST 一般使用条件是 70V/250 mAmps ，2 hours； 若是半干，使用 25V，7 分钟。3）其它细节参见相应 CST 的各个 IL-1β 抗体产品页面上详细步骤。要点：富集
