[13C5]-L-谷氨酰胺

小鼠精子冷冻方法的漫漫「取经路」

年，来自 Jackson Laboratory 的 C.Ostermeier 等人对脱脂牛奶 / 棉子糖冷冻小鼠精子方法的修改，方法是在 CPA（3％脱脂奶和 18％棉子糖组合）中添加单硫代甘油（MTG），这种方法能让 C57BL/6J 品系受精率提高到 60%。近交系 B6 冷冻的方案得到了质的提升，也能满足冷冻需求。 2010 年，Takeo 和 Nakagata 又改良了冷冻方案，即在原来的组合基础上添加了 L-谷氨酰胺，L-谷氨酰胺是血浆和组织中含量最丰富的游离氨基酸，L-谷氨酰胺具有

细胞培养基的使用方法（微孔滤膜过滤除菌）

性，一般与激素或其它物质起相互协同或加成作用。另一种常见的添加物就是血清替代物，目前已有许多可完全或部分替代传统培养液中血清成分的商业产品，其稳定性较好，但批次间仍有差别，产品的成分也不很确定。2、细胞培养基配制 2.1 干粉培养基原倍液的配制 1）配制过滤除菌的细胞培养基 1）阅读培养基使用说明，确定需要添加何种添加剂（如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等）。 2）根据所需将培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水至总体

Nat Metab：李贵登等团队合作发现肿瘤内酸度维持 T 细胞干性影响肿瘤免疫治疗

录组学、代谢组学以及同位素（13C6-葡萄糖，13C16-棕榈酸）示踪技术发现，长期胞外酸处理能够抑制 mTOR 信号通路及糖酵解途径，促进 T 细胞内的脂肪酸氧化（FAO），增强线粒体适应性, 从而维持「干性样」T 细胞的代谢表征。进一步深入分析以及通过 13C5-甲硫氨酸代谢流实验，作者们发现胞外酸度的升高显著抑制了 T 细胞内的甲硫氨酸摄入及一碳代谢（甲硫氨酸循环）。 机制上，一方面，胞外酸处理通过抑制 MYC 的表达，降低 T 细胞表面甲硫氨酸转运体（SLC7A5）的表达，进而削弱 T 细胞对胞外