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DIGE分析(差异凝胶电泳分析)

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  • 2025年07月15日
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      北京百泰派克生物科技有限公司

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      DIGE分析(差异凝胶电泳分析)

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    DIGE分析(差异凝胶电泳分析)是一种用于蛋白质表达差异研究的高效技术,其核心原理基于传统的二维凝胶电泳(2-DE)。与传统方法相比,DIGE分析通过在同一凝胶上对不同样本进行标记使得蛋白质的定量和差异分析更加准确与高效。具体来说,DIGE分析(差异凝胶电泳分析)通过使用荧光染料对样本进行标记,将不同的样本染成不同的颜色,这样可以在同一凝胶上同时分离、对比多个样本,避免了传统二维凝胶电泳中由于样本加载量差异或凝胶运行不一致等因素导致的数据偏差。DIGE分析(差异凝胶电泳分析)的作用非常广泛,尤其是在研究蛋白质表达变化、寻找疾病相关标志物、探究药物作用机制及优化生物工程过程等方面具有不可替代的优势。传统的蛋白质组学技术虽然也能实现蛋白质的分离与定性,但在复杂样本中的分辨率和准确性常常受到限制,而DIGE分析通过荧光标记技术不仅提高了实验的灵敏度,还使得数据的比较和差异化分析变得更加直观和可靠。对于多样本、多时间点的比较,DIGE分析(差异凝胶电泳分析)可以有效解决不同实验条件间的技术误差,确保数据的高重复性和高精度。

     

    从技术层面讲,DIGE分析(差异凝胶电泳分析)充分体现了现代蛋白质组学对高分辨率和高通量的需求。在二维凝胶电泳中,蛋白质首先根据其等电点在pH梯度上进行分离,接着根据分子量进行二次分离。DIGE分析(差异凝胶电泳分析)在此基础上,采用荧光染料标记技术使得蛋白质的定量分析更加精确。实验者可以通过扫描不同的荧光信号,准确获取每种蛋白质的表达量,甚至是极其微弱的变化。这种高灵敏度的优势使得DIGE分析能够捕捉到传统方法无法发现的微小差异,从而为复杂样本的蛋白质组学研究提供了有力支持。

     

    除了灵敏度和高通量,DIGE分析(差异凝胶电泳分析)在数据分析上也具有优势。在实验结束后,所得到的图像会通过专门的软件进行定量分析。这些软件能够帮助研究人员从复杂的凝胶图像中提取出有意义的蛋白质峰值,并通过与数据库比对推测出蛋白质的身份。这一过程中,DIGE分析(差异凝胶电泳分析)能够提供清晰的数据对比,帮助研究者深入理解蛋白质表达的变化及其潜在的生物学意义。随着技术的不断更新和算法的优化,DIGE分析在蛋白质组学分析中的应用将越来越广泛,成为科研人员研究生物过程和疾病机制的不可或缺的工具。

     

    百泰派克生物科技在DIGE分析服务领域拥有丰富的经验和技术积累。我们为广大客户提供高效、精准的蛋白质组学分析服务,帮助客户从海量数据中提取有价值的生物信息。

     

    百泰派克生物科技特色项目

     

    一、蛋白测序

    百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析,提供基于质谱的蛋白测序分析服务,包括对蛋白质的氨基酸组成分析,N端测序,C端测序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质,提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务,对蛋白序列进行分析。

     

    ※服务优势:

    1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

    2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

    3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

    4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

    5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug,即可完成检测;

    6.测序不受N端封闭,PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

     

     

    二、蛋白质组学

    百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务,助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

     

    ※服务优势:

    1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析,发现新的生物标记物;

    2.体内体外多种蛋白质标记方法,适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

    3.质谱分析灵敏度高,实验结果重复度高;

    4.可检测较低丰度蛋白,线性范围广;

    5.专业生物信息学分析,分析更系统准确。

     

     

    三、单细胞质谱流式技术分析

    百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析,采用金属元素标记物(通常是金属元素标记的特异抗体)标记细胞表面和内部的分子,然后用流式细胞原理分离单个细胞,再用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析单个细胞的原子质量谱,最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

     

    ※服务优势:

    1.技术先进,填补技术空白

    采用金属标记抗体技术,避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征,百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

    2.分析数量大,成本较低

    单细胞RNAseq受成本等因素限制,所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右,而流式质谱技术一次(单样本)就可分析至少10^5的细胞,实现了数量级的提高,且成本不高于单细胞RNAseq。

    3.应用前景大

    ①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化,在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景;

    ②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外,质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰;

    ③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

     

     

    四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

    百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析,可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究,旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案,深入挖掘未知的靶标。

     

     

    五、生物药物表征

    百泰派克基于高分辨率质谱技术,MALDI TOF,高效色谱分离技术,提供一系列完善的生物药物分析方案,从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析,到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务,帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

     

     

    百泰派克生物科技七大检测平台

    产品细节图片1

     

     

     

    百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商

    北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

    1.公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;

    2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;

    3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;

    4.七大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;

    5.服务3000+企业,10000+客户的选择;

    6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

     

     

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    相关实验
    • DIGE差异凝胶电泳相关资料贴

      质,线形动态范围在5个数量级左右。该方法也提高了定量上的准确性。由于实验方法本身造成的蛋白质斑点强度的差异,比如样品在进入胶条时会有一些样品损失,但在同一块差异凝胶电泳胶上就不会出现这样的差异DIGE 可在同一次检测中通过分析单一胶上的相互覆盖的信息来得到蛋白质的信息,可以同时在一块胶上在相同电泳条件下分离2~3 个样品,大大减少了一个实验需要的胶的总数。 虽然从理论上来说,该方法非常诱人, 但DIGE 本身还有很多技术上的问题。主要的问题在于: 1) 只有当约1 %~2 %的蛋白质的赖氨酸

    • 番茄叶和根二维差异凝胶电泳DIGE)

      。运用不同的程序软件比较分析在相同凝胶上的不同样本尽管可行,但要精确比较蛋白质点,需要对大量的图片进行处理和分析。可用的、有限的高动态蛋白标记技术及上述方面限制了二维蛋白质凝胶电泳中蛋白质点的分析速度和准确定量。 2D-DIGE 技术 [7] 是在 2D 凝胶技术的基础上增加了一个准确定量的元件。它可以在比较多个样本的蛋白质丰度变化的同时,对置信度进行统计学分析 [ 8,9] 。比较蛋白样品时是先用蓝色荧光染料标记,然后再混合,最后在相同的 2D 凝胶中进行分离。这样消除了蛋白在不同凝胶

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