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- 华尔纳生物
- WN-14420
- 武汉
- 2025年07月11日
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- 文献和实验
- 技术资料
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武汉华尔纳生物科技有限公司
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5
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细胞代次低，活性高，品质保证，提供全程7*24小时专业技术指导售后服务 （养不活无理由全额退款）
类别 | 原代细胞 |
生长特性 | 贴壁生长 |
培养体系 | 人外周血巨噬细胞完全培养基 |
传代方法 | 1：2，每2-3天换液一次 |
细胞形态 | 圆形，不规则细胞 |
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文献和实验人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血，用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释，上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中，先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液（1.077 g/mL），再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液，血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注：Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温，温度过高会导致分离不明显，温度过低会导致密度过大，同样分离效果不好， 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移
人外周血单细胞悬液制备流程 1.采集人外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入100 μL新鲜血和2 mL 1×红细胞裂解液，混匀，4℃裂解10 min。 300 g离心5 min（裂解完立即离心，防止时间过长损伤细胞），弃上清，得到白色细胞沉淀。 PBS洗涤一次。 加入100 μL细胞染色缓冲液重悬细胞，不用计数，即可进行后续流式抗体染色实验。按照100 μL新鲜血样本制备的单细胞悬液，加入1 Test对应的流式抗体混匀进行后续实验。 注意事项： 1. 采血用抗凝管，有肝素和EDTA两种
度的功能细胞。二、人外周血中 CD4 T 细胞分选实例1.产品信息： MojoSort™ Human CD4 T Cell Isolation Kit（BioLegend, Cat#480009），阴性分选试剂盒2.检测仪器型号：BD LSRⅡ3.样本：正常人外周血4.分选前后检测相关产品：PE-CD4（Biolegend, Cat# 317410）5.实验过程（1）采血之后采用达优™ 人淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞。分离之后能见到明显的白膜层。（达优，Cat#DKW-KLSH-0100
