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武汉华尔纳生物科技有限公司
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类别 | 原代细胞 |
生长特性 | 贴壁生长 |
培养体系 | 鸡小肠黏膜上皮细胞完全培养基 |
传代方法 | 1:2,每2-3天换液一次 |
细胞形态 | 铺路石状细胞,不规则细胞 |







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文献和实验实验材料:1. 动物胎体胃黏膜,胃溃疡或胃癌手术切除的正常胃黏膜组织2. 1%Ⅳ胶原蛋白或1%明胶铺培养瓶,4℃冰箱内过夜,使用前在37℃培养箱内放置2h,然后用培养液浸洗1次。3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.44. 250000U/LⅠ型胶原酶或125000U/LⅠ型胶原酶和0.5%透明质酸酶,DMEM配置5. 解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊6. 离心管(15ml、50
胎鼠,放入70%乙醇中消毒1min。经腹正中切口取出小肠,放入预冷的PBS中。 2. 用PBS冲洗后,剪除肠系膜。纵行剪开肠壁,用PBS冲洗3次,洗去粘液。 3. 将肠壁剪成1mm3 左右的小块的组织块,放入20ml消化液中,37℃水浴中振荡消化30min。 4. 用吸管反复吹打组织块3-5min,然后以1000r/min,离心5min。吸去消化液后,加入PBS,反复吹打,悬浮沉淀的肠绒毛组织。在相差显微镜下观察可见单个黏膜上皮细胞或隐窝细胞团。 5. 将消化下来的细胞
2-3次,将黏膜剪成约1mm3 大小的组织块。 2. 将植块放入培养皿中,上皮面朝下;也可在培养皿内放入盖玻片,将组织块放在盖玻片上培养。 3. 当组织块贴壁后,加入适量培养液,培养液的量为能湿润组织块但不使组织块浮起为宜,在37℃、5%CO2 培养箱内静置培养。 4. 组织块贴壁1-3d后,补充培养液。以后每隔2-3d换液1次。 5. 植块培养3d后,细胞从植块边缘迁出。1周后,细胞向外迁移扩展,并逐渐分化,细胞的形态逐渐趋向正常食管黏膜上皮细胞







