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HD11细胞MAVS基因敲除稳转细胞株构建

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  • 华尔纳生物
  • WN-55948
  • 武汉
  • 2025年07月12日
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      武汉华尔纳生物科技有限公司

    • 库存

      999

    • 英文名

      HD11

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      5

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    HD11细胞MAVS基因敲除稳转细胞株构建/HD11细胞MAVS基因敲除稳转细胞株构建/HD11细胞MAVS基因敲除稳转细胞株构建
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    细胞蓝色图

    类别

    稳转细胞系

    生长特性

    贴壁生长

    培养体系

    专用培养基

    细胞形态

    上皮细胞样

    冻存条件

    建议1:2或1:3传代,每2~3天换液1次 细胞库无血清冻存液

    细胞株构建流程

    (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞;(3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株;(4)稳转株质检(COA)。

    细胞备注

    如混合稳转细胞株带抗性基因,建议每传8~10代用相应抗性药物筛选一次(12μg/mL);或在细胞培养过程中添加适当浓度的抗性药物以维持细胞株阳性率(1.2μg/mL)。
    注意事项

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    论文

    国内外引种

    服务

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    相关实验
    • 基因递送的多面手:慢病毒载体

      目前慢病毒载体主要应用在以下几个方面: 细胞基因治疗(截止目前,已上市的 CAR-T 产品有 9 款采用了慢病毒载体递送 CAR 基因) 基因表达调控(过表达、RNA 干扰研究等) 基因编辑(CRlSPR/Cas9 gRNA 文库筛选、基因敲除、敲入、点突变、基因激活/抑制) 稳转细胞株构建 活体细胞成像追踪 转基因动物 图 1 慢病毒载体的主要应用方向   应用案例   案例 1:用慢病毒载体进行基因过表达,构建稳转细胞株,研究葡萄糖激酶在前列腺癌(PCa)中的作用[1] 细胞

    • 慢病毒载体基础知识及应用

      表达或小RNA干扰作用持续且稳定,并随细胞基因组的分裂而分裂(图1)。     图1 慢病毒作用机制 慢病毒载体具有宿主范围广,免疫原性低,基因容量大,可以长期表达等特点。能够有效地感染培养的肿瘤细胞、肝细胞、心肌细胞、神经元、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞。 慢病毒的感染具有整合特性,能够将外源基因有效地整合到宿主染色体上,达到持久性表达,因而可构建稳转细胞株,用于基因的细胞功能研究。使用慢病毒载体改造T细胞可用于CAR-T细胞治疗,CRISPR/Cas9文库构建使用的也是慢病

    • 你已经是个成熟的细胞了,该学会自己做实验了

      之降解,是在 RNA 水平上的降低目的基因的表达。此时,基因敲除稳转株可以很大程度上规避这个问题。因为基因敲除稳转株是在基因组水平上通过基因序列的改变使其基因功能丧失,在敲除细胞中通常不会检测到靶蛋白的表达,而且敲除效果稳定,不能恢复,也就是永久性敲除了。但是基因敲除稳转株缺点是操作周期长,费用多,效率低。如何选择基因下调表达的方式,就要综合考虑了。那么同样是稳定株,单克隆?混合克隆?要怎么选?细胞:当需要去除细胞群体干扰因素的时候,推荐使用单克隆稳定细胞株,其基因组背景相对单一,对实验

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