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武汉华尔纳生物科技有限公司
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HEK-293T-GFP-Puro
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细胞代次低,活性高,品质保证,提供全程7*24小时专业技术指导售后服务 (养不活无理由全额退款)

类别 | 稳转细胞系 |
生长特性 | 贴壁生长 |
培养体系 | 专用培养基 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
冻存条件 | 1:2~1:4传代,每2~3天传代或换液一次。 细胞库无血清冻存液 |
细胞株构建流程 | 1.构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; 2.慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; 3.用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; 4.稳转细胞株质检(COA) |
细胞备注 | 如混合稳转细胞株带抗性基因,建议每传8~10代用相应抗性药物筛选一次(0.5μg/mL);或在细胞培养过程中添加适当浓度的抗性药物以维持细胞株阳性率(0.05μg/mL)。 |







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文献和实验9 可能促进脱靶效应,这阻碍了其应用于需要高精确度的基因组编辑。而 IDLV 适合递送 Cas9 组分至静息细胞,更适合临床研究,目前已有相关研究成果发表。 作者设计了针对 GFP 的靶点,分别以 LV、IDLV 感染 HEK293T 细胞,在第 7 天提取细胞做全外显子组测序(WES)分析,鉴定出了 16 个基因存在脱靶 4: 载体构建示意图 WES 鉴定脱靶的基因 LV 诱导的插入缺失的频率在 3.4%-24%(深线),而 IDLV 显示出较弱的诱导脱靶插入缺失的能力 0%-6.5%(浅线
就只能转染GFP质粒,一般情况下转染DNA好的话,转染siRNA也不会差的。个人觉得细胞本身的性质决定了转染效率。littleemma认为:如果HEK293或293T有你的目的基因的话,可以试一试在HEK293或293T中的干扰效率。因为HEK293或293T是认为转染效率较高的细胞。如果HEK293或293T效率好而你的细胞不好就是转染的问题;如果HEK293或293T干扰效果都不好,那你的siRNA可能设计的不太好。lzc69:请教littleemma,针对GFP的siRNA是不是在设计
情况下悬浮细胞转染效率较低,贴壁细胞的转染效率因细胞不同,有些很高有些很低。HepG2的DNA转染效率大概有50%,siRNA暂时没做过。 如果你有GFP质粒和针对GFP的siRNA共转染,用只转染GFP质粒的孔做对照,可以看出转染效率。 如果没有针对GFP的siRNA就只能转染GFP质粒,一般情况下转染DNA好的话,转染siRNA也不会差的。个人觉得细胞本身的性质决定了转染效率。 littleemma认为: 如果HEK293或293T有你的目的








