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武汉华尔纳生物科技有限公司
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SLC38A10
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类别 | 基因敲除株 |







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文献和实验可以对所有细胞系和大多数常用实验动物的遗传物质进行改造。CRISPR 技术在人类遗传性疾病、病毒感染疾病和癌症的相关研究中具有广阔前景和巨大发展潜力。 操作流程: 1、靶位点确认及 sgRNA 设计 2、构建哺乳动物细胞 Cas9/sgRNA 载体 3、sgRNA 活性验证 4、细胞转染 5、筛选特定表型细胞 6、基因组 NGS 测序 7、建立稳定敲除的细胞株 研究思路: 1. 哺乳动物细胞基因敲除(knock-out)/敲入(knock-in) (1)sgRNA 设计 基因组定制化的 sgRNA 设计
【原创】基因组编辑三大工具ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9筛选基因敲除细胞系阳性克隆Protocol
们。也欢迎跟帖提问。我不定期回答大家的疑问。欢迎分享、转发、收藏给您的好友、同事、同学及QQ群等。好东西请别自己独自藏着掖着。预祝您实验顺利! 这个部分的PS也很重要,希望能够引起,特别是土豪们的注意。那就是关于癌细胞株用来从事科学研究之我见,供参考。欢迎战友们补充。土豪我们做朋友吧。嘻嘻!PS一三事:(土豪请重视) 1. 在癌细胞系上做基因敲除,科学家有此想法由来已久。HGP后,科学家能够读取基因信息,RNAi现象的发现被很快开发并运用到基因的敲低工作中来,虽然不能达到彻底敲除的目的,但至少在那个时代
之降解,是在 RNA 水平上的降低目的基因的表达。此时,基因敲除稳转株可以很大程度上规避这个问题。因为基因敲除稳转株是在基因组水平上通过基因序列的改变使其基因功能丧失,在敲除细胞中通常不会检测到靶蛋白的表达,而且敲除效果稳定,不能恢复,也就是永久性敲除了。但是基因敲除稳转株缺点是操作周期长,费用多,效率低。如何选择基因下调表达的方式,就要综合考虑了。那么同样是稳定株,单克隆?混合克隆?要怎么选?细胞:当需要去除细胞群体干扰因素的时候,推荐使用单克隆稳定细胞株,其基因组背景相对单一,对实验






