hPSC诱导肺类器官成熟培养基

hPSC 诱导肺类器官成熟培养基产品描述

Cat NO : IMV-A016

本产品为 hPSC 诱导肺类器官成熟培养基，可以维持 hPSC 诱导分化肺类器官试剂盒 (IMV-L001)诱导分化获得的肺类器官的长期生长、传代扩增。

实验仪器、材料

仪器：生物安全柜、细胞培养箱、水平式离心机、倒置显微镜、低温冰箱

材料：细胞培养板(规格为：6 孔、12 孔、24 孔)、离心管(规格为 15 mL 和 50 mL)、移 液器(规格为 10 μL 、100 μL 、1000 μL)、无菌吸头(规格为 10 μL 、200 μL 和 1000 μL)、移液管(规格为 10mL、50mL)

hPSC 诱导肺类器官成熟培养基产品规格

产品货号	产品名称	产品规格	储存
IMV-A016S	hPSC 诱导肺类器官成熟培养基	125mL	-20 ℃ , 12 个月
IMV-A016L		500 mL

实验内容与方法

肺类器官换液

吸去孔中培养基，每孔加入 700μL 恢复室温的肺类器官成熟培养基，并每隔一天更换培养基。

肺类器官传代

(1)取出冷冻的基质胶置于 4℃解冻，并提前将枪头放置在-20℃预冷 1h;

(2)吸除培养基，加入 1mL 预冷的 Tryple(含 1%BSA)，静置 1min;

(3)使用 1mL 移液枪，吹打孔中混合物 40-50 次，注意：不要产生气泡;

(4)每孔加入 1mL 预冷的 PBS ，将混合物转移到 15mL 离心管中;

(5)用 1mL 预冷的 PBS 清洗培养板，并将该清洗液加入上一步的离心管中，并补充预冷的

PBS ，使离心管中的终体积为 12mL;

300g 离心 5min，去上清;

(6)用预冷枪头按每孔 30μL 的量在离心管中加入适量的基质胶，吹打5-8 次，均匀混合单细 胞-基质胶，注意吹打过程中避免产生气泡;

(7)将提前放在培养箱中的 24 孔板取出，在孔中心位置加入 30μL 胶滴，缓慢打入混合液时， 逐渐向上移动枪头，使细胞均匀分布在胶中;

(8)将培养板放在培养箱中，20-30min ，使胶滴凝固;

(9)小心沿孔壁加入 700μL 恢复室温的肺类器官成熟培养基，每隔 1 天换液一次(可周一、 周三、周五换液，周五可添加至 800μL ，周六、周日不换液)，注意：不要碰到胶滴，将孔板 放到培养箱中，继续培养。