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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
充足
- 供应商:
武汉益普生物科技有限公司
- 英文名:
NIH/3T3-GFP
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
| 名称 | NIH/3T3-GFP(小鼠胚胎细胞(绿色荧光标记))(STR鉴定正确) |
| 种属 | 小鼠 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 冻存条件 |
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 |
| 培养方案A(默认) |
生长培养基:
DMEM+10% NCS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
|
| 推荐传代比例 | 1:3-1:6 |
| 推荐换液频率 | 2-3次/周 |
| 注意事项 |
1. 应使用新生牛血清,胎牛血清会促使细胞分化。 2. 药筛:通过慢病毒感染的方式将携带荧光的基因片段整合进细胞基因组,使细胞表达荧光蛋白,在荧光显微镜下可以进行观察,标记后的细胞非常容易进行追踪检测。由于是用慢病毒转染的方式,导致细胞荧光表达量的不确定性,为增强细胞荧光表达量可进行抗性筛选。正常培养过程中定期(一个月2-3次或频率自定)用终浓度4 μg/mL的嘌呤霉素追加筛选,冻存后复苏也建议可以追加筛选一次,不需要培养过程中每天都加药。 |
| 背景描述 | NIH/3T3是从NIH Swiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触性抑制的连续传代细胞株。为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株,建立的NIH/3T3细胞株又进行了5轮以上亚克隆。该细胞株对肉瘤病毒的转化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感,对DNA转化及转染研究十分有用。鼠痘病毒阴性。 |
| 年龄(性别) | 胚胎 |
| 组织来源 | 胚胎 |
| 细胞类型 | 自发永生化细胞系 |
| 生物安全等级 | BSL-2 |
| 倍增时间 | ~20 hours |

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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
) 慢病毒介导CD63-GFP表达:将外泌体的特定蛋白CD63和绿色荧光蛋白GFP的表达元件构建成质粒再包装到慢病毒中,随后用此慢病毒感染细胞,使细胞分泌的外泌体带有绿色荧光。 图九 用GFP标记的外泌体分别与SH-SY5Y、BV2和DRG细胞共培养(Rui Ren et al., Artif Cells Nanomed Biotechnol. 2019) 图十 注射有CD63-GFP的外泌体后观察第1天(D1)和第5天(D2)的荧光(Rui Ren et al
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