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- 2025年07月14日
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100
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无锡莱弗思生物实验器材有限公司
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5 mg
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文献和实验2.2.10 DNA微阵列法 Yan等2001年[40]将以分子杂交为基础的微阵列技术应用于DNA甲基化检测中，这种方法是基于杂交的寡核苷酸微阵列，是一种在基因组中寻找新位点的方法。包括用于整个基因组范围内扫描的差异甲基化（DMH）杂交（Huang等1999年[41]）和用于检测某个位点的甲基化特异性微阵列MSO（Gitan等2002年[42]）。前者类似于mRNA表达谱或cDNA微阵列，是CpG岛微阵列，后者类似于寡核苷酸微阵列，是针对CpG二核苷酸位点的甲基化特异性寡核苷酸微阵列[26
血清和 0.03% 三重氢核 X-100 ）孵育 30 分钟； 25 ）加入抗地高辛抗体（ 1/200 的上述缓冲液，来自 Boehringer Mannheim ）， 37 ℃孵育 3 小时； 26 ）缓冲液 A 清洗 2 次，每次 10 分钟； 27 ）缓冲液 B 清洗 2 次，每次 5 分钟； 28 ）制成 NBT/BCIP 暗处保存 30-60 分钟，显微镜下进行观察，如果背景尚佳，显色时间可延长到 16 小时； 29 ）停止缓冲液 B 的反应，用水进行简单的清洗
芯片的制备主要采用三种方法：即光蚀刻合成法，压电印刷法，点样法。1.1.1 光蚀刻合成法 是最初使用的一种方法，其主要过程是：在固相支持物上偶联带有可感光保护基团X的羟基，汞光有选择地照射到固相支持物，去掉可感光保护基团X，使羟基成为有功能的自由羟基，与加入的带X的核苷酸偶联，第一个反应物被嫁接到目标位置上。随着反应的重复，链不断地延伸，当所需的寡核苷酸链合成完后，对反应基板进行无遮板的汞光普照，去除所有X，即可得到所多方面的寡核苷酸阵列。这样，光照模式和反应物的加入顺序决定了合成产物的序列
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