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无锡莱弗思生物实验器材有限公司
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1 mg
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文献和实验Aebersold和其合作者开发了一种同时对蛋白质组进行鉴定和相对定量的方法,即一种包含在无胶蛋白质组流程中的同位素标记技术(Gygi等,1999)。 他们提出使用一种试剂,这种试剂能够使两种同位素在形式上具有明显的区别,即同位素标记的亲和标签(isotopicallycodedaffinitytag,ICAT)试剂。ICAT试剂的结构包含一个生物素头部、一个连接部分和一个碘激活的羰基基团,这个羰基基团能够特异性地与半胱氨酸侧链反应。重同位素的形态与轻同位素的形态的差别相当于在连接
免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)是一种以抗原抗体特异性反应为基础,对组织或细胞中特定抗原(通常是蛋白质)的定性和定位分析的实验方法。免疫组化可以在微观层面上反映出疾病过程中细胞内蛋白质的表达变化,对于病理诊断和研究具有重要价值。通常,根据显色剂(酶、荧光素、同位素、 金属离子等)与样品类型的不同,将免疫组化作以下分类。 图 1 免疫组化病理分类 IHC/ICC(统称为免疫组化)是指通过酶标记物在组织、细胞原位通过抗原抗体反应和化学的显色反应,对特定抗原进行定性和定
简单介绍一下这项技术。Isotope-coded affinity tag ( ICAT) 同位素代码标记技术应用一种含与蛋白质反应基团、乙烯甘油结合区和生物素标记的试剂,这项技术目前主要由美国ABI公司推动。目前,商品化的ICAT试剂可专与蛋白质或肽段的L2半胱氨酸的巯基反应, 所带的同位素标记为含8 个氢原子的(d0) 轻试剂和8 个氘原子的( d8 ) 重试剂。一般的实验步骤是将一个蛋白质样品用轻试剂标记, 另一个样品用重试剂标记, 然后将两个样品混合, 经胰蛋白酶或Lys-C 水解蛋白得到
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