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低温运输,-20℃保存,避光,12个月有效。
- 库存:
现货
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
1ml
用途:蛋白酶抑制剂
注意事项:主要由亮抑蛋白酶肽、胰凝乳蛋白酶抑制剂、抗痛素和抑胃肽酶组成。稀释100倍后使用。工作浓度为5-10umol/L。
低温运输,-20℃保存,避光,12个月有效。
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文献和实验血清的条件培养基,我们强烈建议使用完全培养基作为对照,因为血清中含有一定量的细胞因子。 (3)对于细胞和组织裂解液,我们推荐使用RayBio®细胞裂解液从细胞或者组织中提取蛋白(采用均质机)。用去离子水稀释2×细胞裂解液(我们推荐使用裂解液前添加蛋白酶抑制剂),提取蛋白后,离心样品取上清,检测蛋白浓度。 (4)我们推荐使用:1 ml的条件培养基(未稀释的),或者1 ml的2-5倍稀释的血清或者血浆,或者200-250 µg总蛋白的细胞和组织裂解液,裂解液至少用1×封闭液稀释10倍。 注:样品的量取决于细胞
,C是电容,R是样品的电阻)。假如设备是CD脉冲型发生器,设定电容和并联电阻,以达到合适的τ值。 1.6 将小池放进盛样品的池中,启动电穿孔装置,供给所需的电脉冲。 1.7 电处理后,向小池加1ml普通培养基,将细胞混合液从小池转移到组织培养容器(培养皿或培养孔)中,再加入一些培养基使最终的培养基体积适量。然后,将样品细胞放回孵育箱中使之在正常条件下生长。 1.8 在测定转移基因的表达量前电穿孔细胞各自培养的时间不同。 2.检测电穿孔效率和细胞存活率 2.1 除用罗丹明偶联葡聚糖(1mg
%,降温至4℃,加入异硫氰酸盐荧光素,(蛋白:荧光素=50~80mg:1mg),在0~4℃下电磁搅拌12~14h。然后用半饱和和硫酸铵将标记球蛋白沉淀分离,除去未结合的荧光素,再用缓冲盐水透析,除去硫酸铵(用Nessler氏试剂测验至隔夜透析之盐水无氨离子及荧光色素为止)。将制备好的荧光抗体加叠氮钠0.01%,分装在1ml安瓿中,或冻干,保存于冰箱中(4℃)可以用半年以上,-20℃保存可达2年以上。 【附一】0.01mol/L pH7.2 PBS 配法:NaCl 18g 、Na2HPO41
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