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- FUJIFILM Wako
- 013-28811
- 2025年07月13日
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- 文献和实验
- 技术资料
抗VGLUT1，豚鼠
Anti VGLUT1, Guinea Pig
VGLUT（Vesicular Glutamate Transporter）是将哺乳类兴奋性突触传递中主要的神经递质谷氨酸转运至突触囊泡的转运蛋白，研究认为它转运谷氨酸时利用了质子电化学梯度。目前已在哺乳动物中发现VGLUT1、VGLUT2 和 VGLUT3三种亚型，它们的表达部位各不相同， VGLUT1主要在大脑皮层和海马体表达，VGLUT2在丘脑、下丘脑和杏仁核等部位表达。而表达VGLUT3的神经元很少，有报告称，根据mRNA表达模式推断，VGLUT3分布于纹状体、海马体、大脑皮层、中缝核等部位1）。在神经科学领域中，抗VGLUT抗体也被用作谷氨酸能神经元的标记抗体。
“抗VGLUT1，豚鼠”是豚鼠来源的抗VGLUT1多克隆抗体，可用于免疫组化染色的多重染色。
◆抗体信息
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抗体种类 |
多克隆抗体 |
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抗原 |
大鼠VGLUT1的重组蛋白（C端序列相同） |
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免疫动物 |
豚鼠 |
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组成 |
使用PBS稀释抗血清 |
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标记 |
未标记 |
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交叉性 |
小鼠、大鼠 |
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应用 |
免疫组织染色（冰冻切片）1:1,600 |
◆Protocol（示例）
1. 灌注固定：使用0.1%柠檬酸钠/PBS灌注除血后，4% PFA灌注
2. 后固定： 4% PFA （4 h）
3. 蔗糖替换：30%蔗糖/PBS（4℃，过夜~约2天）
4. 制备冰冻切片：去除蔗糖后，制备冰冻包埋块，并用低温切片机制备30 μm厚的切片
5. 甘氨酸处理：25 mM甘氨酸PBS（20 min左右）
6. 封闭：5% 正常山羊血清，0.3% Triton X-100/PBS（4℃，过夜）
7. 一抗：抗VGLUT1, 豚鼠（1︰1,600），1% 正常山羊血清，0.3% TritonX-100/PBS（4℃，过夜~2 天）
8. 清洗：0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)
9. 二抗：Alexa Fluor® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L) (1:1,600) （产品编号： 568-77901)，1% 正常山羊血清，0.3%
TritonX-100/PBS (室温，2 h)
10. 清洗：0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)
11. 封装： 4℃下避光存储
◆数据
应用数据
▼ 免疫组化染色
 |
物种：小鼠 部位：海马体 样品：冰冻切片 抗体浓度：1:1,600
<数据提供> 京都工艺纤维大学 应用生物学系 宮田老师 |
|
神经细胞的染色使用NeuroTrace™ 435/455 Blue Fluorescent Nissl Stain（ThermoFisher Scientific, Inc.） | |
◆Q＆A
关于Protocol
Q：使用哪种二抗比较好？
A：FUJIFILM Wako拥有以下二抗的实绩：
Alexa Fluor® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L)（Jackson ImmunoResearch公司，产品编号：568-77901)
关于应用
Q：可以用于什么动物？
A：已确认可用于小鼠和大鼠，暂未确认是否可用于其他动物。
◆产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 013-28811 | 抗VGLUT1，豚鼠 Anti VGLUT1, Guinea Pig | 50 μL | 免疫化学用 |
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文献和实验参考文献
1.Gras, C. et al.: J. Neurosci., 22(13), 5442(2002).
A third vesicular glutamate transporter expressed by cholinergic and serotoninergic neurons
(determine experimentally). A dilution series of 1:100 to 1:10,000 should cover it. Incubate at RT for 1 hr or longer, depending on the antibody. Sometimes an overnight incubation is helpful. Jon''s anti-actin Guinea pig antibodies from animal#1 are best
Yeast IF with Methanol/Acetone Dehydration
is helpful. Jon''s anti-actin Guinea pig antibodies from animal#1 are best at 1:6,000, #2 and #3 are best at 1:2,000. Wash the cells 4 x 5 min with the block solution. Sometimes longer incubation times may lower the background but this is usually
Yeast IF with Methanol/Acetone Dehydration
at the appropriate dilution (determine experimentally). A dilution series of 1:100 to 1:10,000 should cover it. Incubate at RT for 1 hr or longer, depending on the antibody. Sometimes an overnight incubation is helpful. Jon's anti-actin Guinea pig antibodies
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