人骨髓间充质干细胞（P2代）

原代细胞培养注意事项有哪些？

发生了改变，所以变黄； 正常贴壁细胞在培养几天后，会逐渐贴满整个瓶底或者皿底，呈现出相应的形状，有的呈纤维状，有的呈多边形； 细胞的第一次传代，一定要密度高一些传代原代细胞传代密度低，很难长起来。建议 1:2-1:3 传代，如果细胞数量够的条件下，P2-P3 代完成实验是最好的。如果细胞数量不够，那细胞的提取和培养比较重要，尽可能地让细胞的好状态多维持几代对实验成败来说至关重要； 原代细胞不建议冻存，因为冻存很容易复活不成功。如果要冻存的话，建议在 P2 或 P3 代冻存，一些比较难复苏的细胞

骨髓间充质干细胞形态能否做细胞鉴定和转染实验

cai_xiehe： 各位战友，帮我看一下我们的培养的第二代SD大鼠骨髓间充质干细胞形态如何，能否拿去做流式细胞鉴定和慢病毒载体转染实验，万分感谢！ 再发一张也是第二代SD大鼠骨髓间充质干细胞图片 丁香园网友 huli317 认为： 想问问你这细胞是传代后多久的？ 这细胞形态真的太差了，特别是第二代就这种形态，你接下来的实验怎么完成啊 用作流式

如何提高转染率

oldhappy求助：我做的是脂质体法转染（lipfectermine 2000）骨髓间充质干细胞（c57小鼠），现在刚转的是第3代细胞，铺板都很好，细胞密度也很大，但是36-48h观察基本没有荧光，也应该是没有转上了，宁外我的重组质粒时间很长了，提取有2个多月了，是不是这也有很大关系，以前的转染还算成功的/转染量如下。A2.0重组质粒+50 培养基 B1.5脂质体+50 培养基A4.0重组质粒+50培养基 B2.0脂质体+50培养基 （单位均为微升）希望各位战友给点意见，不胜感激！！谢谢丁香