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深圳顺辰生物技术有限公司
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仅供科研研究、实验使用
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美国GENMED品牌产品由国际优秀留美博士团队创建的生物医药科技企业。公司总部位于美国生物医药之谷波士顿地区。公司创办人在美国深造、研究、工作和创业十三余年,曾任美国哥伦比亚大学肿瘤遗传研究院的研究员,负责主持美国卫生部、农业部和能源部的多项重大科技项目。
美国GENMED品牌主营业务包括有:细胞培养(Cell Culture)试剂技术、分子技术、蛋白化学技术、免疫抗体技术、医学技术、生物化学技术、模式生物技术、微生物技术、植物技术、载体技术、毒理技术、营养技术、平台技术、生物分类学(taxonomy)分析技术等20余项,详细的项目可以咨询在线客服!
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文献和实验成固体 图4 随着研钵的温度回复到室温,Trizol试剂逐步又变为液体 4、把此Trizol试剂转移到玻璃匀浆器中,再进一步匀浆3-5min(图5)。 图5 Trizol试剂转移到玻璃匀浆器中,再进一步匀浆5、再把Trizol试剂转移到1.5ml离心管中(图6),后续可以按照Trizol试剂的标准操作抽提总RNA。也可以把此Trizol试剂保存在生物冰(低于15℃即可)邮寄给我们,由我们来完成后续的抽提过程。 图6 把Trizol试剂转移到1.5ml的离心管中 说明: 1、研磨
方式:手动匀浆、机械匀浆 手动匀浆:将样本(含匀浆介质)倒入玻璃匀浆管中,匀浆管下端插入盛有冰水混合物的容器中,将捣杆垂直插入匀浆管,上下转动研磨数十次(6~8分钟),使组织匀浆化。机械匀浆:将已称重的组织装入EP管,加入匀浆介质,用组织匀浆机,在低温条件下,60 Hz,90 s研磨制成组织匀浆。(皮肤、肌肉组织及植物组织等可适当延长匀浆时间)。 注:组织匀浆后,取少量组织匀浆作涂片,显微镜下观察细胞是否破碎,若没有,可适当延长匀浆时间。生化实验一般不推荐用裂解液进行裂解。 样本保存:组织
上清液,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。 组织匀浆 1) 用预冷的PBS(0.01M,PH7.4)冲洗组织以除去表面残留的血液或杂质(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果)。 2) 将组织块称重,然后切成尽可能小的碎块,以便充分匀浆。 3) 加入适量的预冷PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂),用玻璃匀浆器在冰上或冰浴中充分匀浆。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复
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