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美国GENMED品牌产品由国际优秀留美博士团队创建的生物医药科技企业。公司总部位于美国生物医药之谷波士顿地区。公司创办人在美国深造、研究、工作和创业十三余年,曾任美国哥伦比亚大学肿瘤遗传研究院的研究员,负责主持美国卫生部、农业部和能源部的多项重大科技项目。
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文献和实验免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的一项技术。 IHC 的实验流程和方法总体不难,但做出漂亮的染色结果却不容易,所谓“细节决定成败”,也正是IHC 实验中尤为重要的关键点。那么“细节”主要是哪一些呢?下面就为您一一道来。(以石蜡组织切片为例介绍) 标本固定 固定的目的除了使细胞内的蛋白质凝固,减少
【五分钟讲实验】F-actin 怎么看?一篇讲清鬼笔环肽染色和避坑要点
后,PBS 避光洗涤 3 次,每次 5 min。随后使用 DAPI 或 Hoechst 进行细胞核复染 5-10 min。洗涤后加入抗荧光淬灭封片剂封片,并使用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜采集图像。 若样本为钛合金支架、3D支架或厚样本,建议采用 Z-stack 扫描并进行最大强度投影,以更准确评估细胞骨架分布、铺展形态及细胞黏附状态。 五、好结果长什么样? 理想的鬼笔环肽染色不是一片均匀发光,而是能清楚看到F-actin的空间分布。 贴壁细胞中常见细胞边缘、应力纤维、胞质微丝
DAPI 染色 1.原理DAPI为4’,6二脒基-2-苯吲哚(4’,6―diamidino-2―phenylindole)能与双链DNA小槽,特别是AT碱基结合,也可插入少于3个连续AT碱基对的DNA序列中。当它与双链DNA结合时,荧光强度增强20倍,而与单链DNA结合则无荧光增强现象,因此是一种简易、快速和敏感地检测DNA的方法。DAPI的荧光强度虽较Hoechst低,但荧光稳定性优于Hoechst;其特异性较溴化乙啶(ethidlium bromide,EB)和碘
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