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48T
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文献和实验*发表【中文论文】请标注:由上海酶研生物科技有限公司提供;
*发表【英文论文】请标注:From Shanghai EK-Bioscience Biotechnology Co., Ltd.
试剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有无致癌性等优点,因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为405nm。ABTS虽不如OPD和TMB敏感,但空白值极低,也为一些试剂盒所采用。另一种HRP的底物为3-(4-羟基)苯丙酸[3-(4-hydroxy)phenly propionic acid,HPPA],经HRP作用后,产物显荧光,可用荧光光度计测量。用于ELISA的优点为可加宽定量
) *免疫方法 *免疫剂量 *抗体效价的测定 *放血或定期抽血 (1) 动物的选择 选择什么动物来免疫取决于: *所需抗血清的量 -小鼠只能提供1.0~1.5ml的血液,而山羊能提供几升。 *能供免疫用的抗原量 -小鼠50g足够,而山羊需要几毫克。 (1) 动物的选择(续) *动物的品系:免疫动物与提供抗原的动物之间的种系差异越大越好。 -例如哺乳动物的抗原可选择非哺乳动物来制备抗体。 -常用的动物有兔、羊、马、猪等,以兔(新西兰兔,年轻,健壮,体重在2.5kg左右,雄性
失误所 致。胶体金簇如果多的话可能会堵塞膜孔。如果成簇的原因是由于胶体金的疏水 作用力形成的,那么在金标液流动的过程中胶体金颗粒也会粘附在捕捉抗体上。 无论待测物是否存在,金标的抗体都可能会与捕捉抗体发生非特异性免疫反 应。虽然在 ELISA 技术中在一对抗体之间发生类似的反应可能不是经常发生的, 但是这种方法会使硝酸纤维素膜上的标记抗体与捕捉抗体非常接近,从而提高了 发生非特异性免疫反应的可能性。另外,特别是在使用多克隆抗体时,有可能会 发生与样品中其它待测物的非特异性的反应,这种非特异性反应的发生与否主要
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