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详询
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详询
- 英文名:
EcoRI enzyme, 5000 U, with 10X reaction buffer
- 库存:
99
- 供应商:
北京孚博生物
- CAS号:
详询
- 规格:
5,000U
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文献和实验Restriction Enzyme Buffer Most enzymes can use REact buffers; however, some are made up separately. Use fresh Milli-Q water , siliconized or sterile glassware or disposable plastic ware to make the following stock solutions up fresh (discard
Mouse p27 PCR Using Gitschier Buffer
with H2O and aliquot into 1.5 mL eppendorf tubes PCR Reaction Mix (To make a fresh master mix, multiply # PCR reactions x volumes, below) 2 µL KG-1 (10x) 1x 2 µL KG-2 (10x) 1x 2 µL Primer 1 (1uM) 0.1 mM 2 µL Primer 2 (1uM) 0.1 mM
片段,检查是否是载体酶切没有切开; 2.根据您的描述,您的这2个酶切位点相距过近,同时酶切的话可能会存在位于前面的酶切开后,后面的酶因为缺少保护碱基而酶切效率低下的情况;这种情况建议先切后面的位点,待线性化后(可跑胶确认)再加入第一种酶酶切,这样可以保证酶切效率; 3. 为了避免自连,可以对酶切后的载体使用热敏磷酸酶(M0289)对载体去磷酸化,补加10x的热敏磷酸酶Buffer后该反应可以在 NEBuffer1,2,3,4和EcoRI Buffer中进行。反应完成
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