- ￥960
- EK-Bio（酶研生物）
- E3772
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
48T
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
人细胞粘附蛋白相互作用蛋白(CYTIP)ELISA Kit
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
人细胞粘附蛋白相互作用蛋白(CYTIP)ELISA Kit5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
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文献和实验kDa预染的中高范围蛋白质分子量标准(20-210KD) 20次自产320元预染的中高范围蛋白质分子量标准(20-210KD) 50次自产680元分子量大小:210, 140, 106/102, 80, 52, 20 kDa预染的中高范围蛋白质分子量标准(18.3-210KD)2668148次Pierce1214元(二)蛋白质转印a)膜的选择:主要采用 NC膜和PVDF膜,其比较如下: NC膜PVDF膜物理强度差好蛋白质结合能力80-100ug/cm2100-200ug/cm2溶剂耐受力无有考马
内参抗体需要考虑的因素✦ 分子大小内参蛋白分子大小（kDa）的选择非常重要，与目标蛋白相比，内参蛋白应该要足够大或足够小，以便与目标蛋白区分。如果目标蛋白和内参蛋白大小相当的话，WB 结果无法直接观察，很难进行准确数据的分析。✦ 线性范围及上样量线性范围是条带强度与膜上目标蛋白表达成比例的区域，过高或过低的上样量都会产生误差。很多情况下，目的蛋白的表达量相较于内参来说非常低，常常需要加大上样量，但是，这时内参表达量就会超出线性范围。超载的凝胶，在所有的泳道上表现出相同的条带强度，这种检测无疑是不准
.3gTris，188g甘氨酸，10gSDS，用蒸馏水溶解至1000ml，临用前稀释10倍。PH8.3 9、 转移缓冲液： 2.9g甘氨酸、5.8gTris碱、0.37g SDS（可不加），200ml甲醇（临用前加），加水至总量1L。 10、 丽春红染液储存液：丽春红S 2g 三氯乙酸30g 磺基水杨酸 30g 加水至100ml 用时上述储存液稀释10倍即成丽春红S使用液。使用后应予以废弃。 11、 脱脂奶粉5%(w/v)。 12、 NaN3 0.02% 叠氮钠(有毒，戴手套操作)，溶于磷酸
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