pBK-CMV质粒

【求助】IRES的长度

254774755 请问各位大侠： 我的基因构建结果如下 CMV目的基因IRES目的基因PolyA 我要做上面基因的pcr鉴定，请问CMV，IRES，polyA碱基个数有人知道吗？ freecell 那你得先问自己了： 你为何要把做这样的克隆？ zhujoker 呵呵，引起Freecell版主亲自关注了。的确你问的问题有的不是很清楚，既然质粒

重组腺病毒构建、扩增及纯化

（细菌内同源重组AdEasy System）一、目的基因的克隆（以pshuttle-CMV质粒为例）步骤1、选择适当酶切位点，进行酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。2、重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。3、重组质粒扩增，纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。4、用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒，电泳鉴定质粒完全被切开。5、胶回收线性化质粒，以备共转化使用。二、共转化 1、大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 （1）从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌，接种于LB

【求助】质粒转染细胞，western鉴定不行，求助

的基因可能有启动子喜好，一般情况下CMV启动子就可以了，如果不行可以试一下E2F1,AP-1等别的启动子的载体，希望建议对你有用。 whm5869 pharmaceutic wrote: 以前我站构建质粒的时候也遇到过这种问题，最后换了一个载体以后就表达了。最后分析认为不同的基因可能有启动子喜好，一般情况下CMV启动子就可以了，如果不行可以试一下E2F1,AP-1等别的启动子的载体，希望建议对你有用。